中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2011年
10期
1982-1988
,共7页
招志毅%陈建苏%余榕捷%刘晓飞%谭美华%李红阳
招誌毅%陳建囌%餘榕捷%劉曉飛%譚美華%李紅暘
초지의%진건소%여용첩%류효비%담미화%리홍양
Maxadilan%诱导多能干细胞%细胞增殖%染色体核型分析
Maxadilan%誘導多能榦細胞%細胞增殖%染色體覈型分析
Maxadilan%유도다능간세포%세포증식%염색체핵형분석
目的:探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)的PAC1受体特异激动剂maxadilan对人诱导多能干细胞(IPSCs)增殖的作用.方法:培养人IPSCs,利用RT-PCR和Western blotting检测IPSCs的PAC1受体;IPSCs培养基中加入不同浓度的maxadilan作为实验组,未加入maxadilan作为对照组.CCK-8法检测maxadilan对IPSCs增殖的影响;流式细胞仪分析maxadilan对细胞周期的影响;染色体核型分析检测maxadilan对IPSCs核型的影响;real-time-qPCR和免疫荧光法从基因及蛋白水平检测maxadilan对IPSCs的多能性基因Nanog和OCT4的影响;real-time qPCR检测maxadilan对IPSCs及其形成胚体细胞的Nestin和PAX6基因的影响;RT-PCR检测maxadilan对IPSCs分化为三胚层能力的影响.结果:RT-PCR和Western blotting均显示IPSCs含有PAC1受体;CCK-8法显示100 nmol/L maxadilan组比对照组细胞增多16% (P＜0.05);流式细胞仪分析显示孵育100 nmol/L maxadilan 3 h、6 h和9 h后IPSCs增殖指数为47.23%、59.70%、55.67%,与对照组37.00%相比,差异显著(P＜0.05);染色体核型分析显示maxadilan处理过的IPSCs核型正常;RT-PCR、real-time qPCR和免疫荧光法显示maxadilan未影响IPSCs多能性.结论:人IPSCs存在PAC1受体,maxadilan对人IPSCs具有促进细胞增殖作用且没有影响IPSCs的多能性和染色体核型.
目的:探討垂體腺苷痠環化酶激活肽(PACAP)的PAC1受體特異激動劑maxadilan對人誘導多能榦細胞(IPSCs)增殖的作用.方法:培養人IPSCs,利用RT-PCR和Western blotting檢測IPSCs的PAC1受體;IPSCs培養基中加入不同濃度的maxadilan作為實驗組,未加入maxadilan作為對照組.CCK-8法檢測maxadilan對IPSCs增殖的影響;流式細胞儀分析maxadilan對細胞週期的影響;染色體覈型分析檢測maxadilan對IPSCs覈型的影響;real-time-qPCR和免疫熒光法從基因及蛋白水平檢測maxadilan對IPSCs的多能性基因Nanog和OCT4的影響;real-time qPCR檢測maxadilan對IPSCs及其形成胚體細胞的Nestin和PAX6基因的影響;RT-PCR檢測maxadilan對IPSCs分化為三胚層能力的影響.結果:RT-PCR和Western blotting均顯示IPSCs含有PAC1受體;CCK-8法顯示100 nmol/L maxadilan組比對照組細胞增多16% (P＜0.05);流式細胞儀分析顯示孵育100 nmol/L maxadilan 3 h、6 h和9 h後IPSCs增殖指數為47.23%、59.70%、55.67%,與對照組37.00%相比,差異顯著(P＜0.05);染色體覈型分析顯示maxadilan處理過的IPSCs覈型正常;RT-PCR、real-time qPCR和免疫熒光法顯示maxadilan未影響IPSCs多能性.結論:人IPSCs存在PAC1受體,maxadilan對人IPSCs具有促進細胞增殖作用且沒有影響IPSCs的多能性和染色體覈型.
목적:탐토수체선감산배화매격활태(PACAP)적PAC1수체특이격동제maxadilan대인유도다능간세포(IPSCs)증식적작용.방법:배양인IPSCs,이용RT-PCR화Western blotting검측IPSCs적PAC1수체;IPSCs배양기중가입불동농도적maxadilan작위실험조,미가입maxadilan작위대조조.CCK-8법검측maxadilan대IPSCs증식적영향;류식세포의분석maxadilan대세포주기적영향;염색체핵형분석검측maxadilan대IPSCs핵형적영향;real-time-qPCR화면역형광법종기인급단백수평검측maxadilan대IPSCs적다능성기인Nanog화OCT4적영향;real-time qPCR검측maxadilan대IPSCs급기형성배체세포적Nestin화PAX6기인적영향;RT-PCR검측maxadilan대IPSCs분화위삼배층능력적영향.결과:RT-PCR화Western blotting균현시IPSCs함유PAC1수체;CCK-8법현시100 nmol/L maxadilan조비대조조세포증다16% (P＜0.05);류식세포의분석현시부육100 nmol/L maxadilan 3 h、6 h화9 h후IPSCs증식지수위47.23%、59.70%、55.67%,여대조조37.00%상비,차이현저(P＜0.05);염색체핵형분석현시maxadilan처리과적IPSCs핵형정상;RT-PCR、real-time qPCR화면역형광법현시maxadilan미영향IPSCs다능성.결론:인IPSCs존재PAC1수체,maxadilan대인IPSCs구유촉진세포증식작용차몰유영향IPSCs적다능성화염색체핵형.
