华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2011年
6期
50-54
,共5页
杨佳%怡荣%张立全%牛一丁%王秀珍%哈斯阿古拉
楊佳%怡榮%張立全%牛一丁%王秀珍%哈斯阿古拉
양가%이영%장립전%우일정%왕수진%합사아고랍
油菜%月见草%△6-脂肪酸脱氢酶基因%γ-亚麻酸%农杆菌介导
油菜%月見草%△6-脂肪痠脫氫酶基因%γ-亞痳痠%農桿菌介導
유채%월견초%△6-지방산탈경매기인%γ-아마산%농간균개도
以油菜子叶节为外植体优化了农杆菌介导的甘蓝型油菜的遗传转化体系,为在油料作物中用基因工程手段生产γ-亚麻酸打下基础.采用CaCl2法制备农杆菌AGL1感受态细胞,将已经构建好的植物表达载体pPZP221(35S-D6D-NOS)通过液氮冻融法转化农杆菌,PCR筛选阳性转化子.结果表明:优化的甘蓝型油菜子叶节外植体预培养条件是:MS+ 2.0 mg/L 6-BA+ 0.2 mg/L NAA培养基预培养2d；用于侵染的农杆菌菌液的最适浓度为OD600=0.4,时间为5 min,并得到转基因植株.经侵染的外植体在含有庆大霉素的分化选择培养基上培养,抗性芽移至生根培养基,PCR检测阳性小植株移栽花盆,共得到12株转基因植株,首次将来自月见草的D6D基因通过农杆菌介导法整合到油菜基因组中.
以油菜子葉節為外植體優化瞭農桿菌介導的甘藍型油菜的遺傳轉化體繫,為在油料作物中用基因工程手段生產γ-亞痳痠打下基礎.採用CaCl2法製備農桿菌AGL1感受態細胞,將已經構建好的植物錶達載體pPZP221(35S-D6D-NOS)通過液氮凍融法轉化農桿菌,PCR篩選暘性轉化子.結果錶明:優化的甘藍型油菜子葉節外植體預培養條件是:MS+ 2.0 mg/L 6-BA+ 0.2 mg/L NAA培養基預培養2d；用于侵染的農桿菌菌液的最適濃度為OD600=0.4,時間為5 min,併得到轉基因植株.經侵染的外植體在含有慶大黴素的分化選擇培養基上培養,抗性芽移至生根培養基,PCR檢測暘性小植株移栽花盆,共得到12株轉基因植株,首次將來自月見草的D6D基因通過農桿菌介導法整閤到油菜基因組中.
이유채자협절위외식체우화료농간균개도적감람형유채적유전전화체계,위재유료작물중용기인공정수단생산γ-아마산타하기출.채용CaCl2법제비농간균AGL1감수태세포,장이경구건호적식물표체재체pPZP221(35S-D6D-NOS)통과액담동융법전화농간균,PCR사선양성전화자.결과표명:우화적감람형유채자협절외식체예배양조건시:MS+ 2.0 mg/L 6-BA+ 0.2 mg/L NAA배양기예배양2d；용우침염적농간균균액적최괄농도위OD600=0.4,시간위5 min,병득도전기인식주.경침염적외식체재함유경대매소적분화선택배양기상배양,항성아이지생근배양기,PCR검측양성소식주이재화분,공득도12주전기인식주,수차장래자월견초적D6D기인통과농간균개도법정합도유채기인조중.
