中国抗生素杂志
中國抗生素雜誌
중국항생소잡지
CHINESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS
2012年
4期
276-279,297
,共5页
赤霉菌菌丝体%原生质体%复合破壁酶%诱变育种
赤黴菌菌絲體%原生質體%複閤破壁酶%誘變育種
적매균균사체%원생질체%복합파벽매%유변육충
目的 对赤霉素产生菌原生质体进行制备、纯化、再生工艺改进与完善.方法 本文通过微孔滤膜作载体,在含甘氨酸的菌丝生长培养基固体平板上,培养取得幼嫩菌丝体,并对原生质体制备时的复合破壁酶液组分配比、酶解时间,原生质体纯化再生工艺进行了改进和完善.结果 实验证明:①在幼嫩菌丝体的制备过程中,采用微孔滤膜平板法培养幼嫩菌丝体,易于控制菌龄,生长在微孔滤膜上的菌丝体不混杂有多余的培养基成份,不必经洗涤,可直接酶解,简化了实验步骤;②在原生质体制备过程中,采用以纤维素酶2％+蜗生酶1％+果胶酶0.4％作为复合破壁酶液的组成,可使原生质体的释放量从105升至106;③在原生质体纯化过程中,采用先慢速离心沉淀,后洗涤滤除菌丝断片的操作方法,可使无壁娇嫩易碎的原生质体可依附菌丝断片作缓冲载体一起沉淀,有利于纯化收集到完整的原生质体,提高原生质体的活性再生;④在原生质体再生过程中,选用含有聚胨、酵母膏成份的RM再生培养基,可使原生质体的再生率达到16％以上.结论 原生质体制备、纯化、再生工艺的改进与完善,确保了诱变育种基因突变后的遗传个体绝大部分都是纯合体,避免了高产性状经传代后水平回复的现象,为赤霉素理化诱变育种工作的顺利开展创造了良好条件.
目的 對赤黴素產生菌原生質體進行製備、純化、再生工藝改進與完善.方法 本文通過微孔濾膜作載體,在含甘氨痠的菌絲生長培養基固體平闆上,培養取得幼嫩菌絲體,併對原生質體製備時的複閤破壁酶液組分配比、酶解時間,原生質體純化再生工藝進行瞭改進和完善.結果 實驗證明:①在幼嫩菌絲體的製備過程中,採用微孔濾膜平闆法培養幼嫩菌絲體,易于控製菌齡,生長在微孔濾膜上的菌絲體不混雜有多餘的培養基成份,不必經洗滌,可直接酶解,簡化瞭實驗步驟;②在原生質體製備過程中,採用以纖維素酶2％+蝸生酶1％+果膠酶0.4％作為複閤破壁酶液的組成,可使原生質體的釋放量從105升至106;③在原生質體純化過程中,採用先慢速離心沉澱,後洗滌濾除菌絲斷片的操作方法,可使無壁嬌嫩易碎的原生質體可依附菌絲斷片作緩遲載體一起沉澱,有利于純化收集到完整的原生質體,提高原生質體的活性再生;④在原生質體再生過程中,選用含有聚胨、酵母膏成份的RM再生培養基,可使原生質體的再生率達到16％以上.結論 原生質體製備、純化、再生工藝的改進與完善,確保瞭誘變育種基因突變後的遺傳箇體絕大部分都是純閤體,避免瞭高產性狀經傳代後水平迴複的現象,為赤黴素理化誘變育種工作的順利開展創造瞭良好條件.
목적 대적매소산생균원생질체진행제비、순화、재생공예개진여완선.방법 본문통과미공려막작재체,재함감안산적균사생장배양기고체평판상,배양취득유눈균사체,병대원생질체제비시적복합파벽매액조분배비、매해시간,원생질체순화재생공예진행료개진화완선.결과 실험증명:①재유눈균사체적제비과정중,채용미공려막평판법배양유눈균사체,역우공제균령,생장재미공려막상적균사체불혼잡유다여적배양기성빈,불필경세조,가직접매해,간화료실험보취;②재원생질체제비과정중,채용이섬유소매2％+와생매1％+과효매0.4％작위복합파벽매액적조성,가사원생질체적석방량종105승지106;③재원생질체순화과정중,채용선만속리심침정,후세조려제균사단편적조작방법,가사무벽교눈역쇄적원생질체가의부균사단편작완충재체일기침정,유리우순화수집도완정적원생질체,제고원생질체적활성재생;④재원생질체재생과정중,선용함유취동、효모고성빈적RM재생배양기,가사원생질체적재생솔체도16％이상.결론 원생질체제비、순화、재생공예적개진여완선,학보료유변육충기인돌변후적유전개체절대부분도시순합체,피면료고산성상경전대후수평회복적현상,위적매소이화유변육충공작적순리개전창조료량호조건.
