湖南师范大学自然科学学报
湖南師範大學自然科學學報
호남사범대학자연과학학보
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NORMALIS HUNANENSIS
2012年
5期
64-67
,共4页
朱玲%徐腊梅%盛立翔%吴秀山%莫小阳
硃玲%徐臘梅%盛立翔%吳秀山%莫小暘
주령%서석매%성립상%오수산%막소양
Mef2%原核表达%多克隆抗体
Mef2%原覈錶達%多剋隆抗體
Mef2%원핵표체%다극륭항체
为了在果蝇模型中进一步研究Mef2基因的功能,制备了Mef2多克隆抗体.以果蝇cDNA文库为模板,PCR扩增出亲水性和特异性均好的果蝇Mef2基因片段,将其克隆入pET-28a原核表达载体,然后将重组质粒转化人大肠杆菌菌株Rossetea,用IPTG诱导表达融合蛋白.融合蛋白先经Ni-IDA凝胶柱纯化,再免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,然后用不同浓度的抗体分别进行Western-blot实验检测抗体效价.所得结果显示获得了较高效价的果蝇Mef2多克隆抗体.
為瞭在果蠅模型中進一步研究Mef2基因的功能,製備瞭Mef2多剋隆抗體.以果蠅cDNA文庫為模闆,PCR擴增齣親水性和特異性均好的果蠅Mef2基因片段,將其剋隆入pET-28a原覈錶達載體,然後將重組質粒轉化人大腸桿菌菌株Rossetea,用IPTG誘導錶達融閤蛋白.融閤蛋白先經Ni-IDA凝膠柱純化,再免疫新西蘭大白兔製備多剋隆抗體,然後用不同濃度的抗體分彆進行Western-blot實驗檢測抗體效價.所得結果顯示穫得瞭較高效價的果蠅Mef2多剋隆抗體.
위료재과승모형중진일보연구Mef2기인적공능,제비료Mef2다극륭항체.이과승cDNA문고위모판,PCR확증출친수성화특이성균호적과승Mef2기인편단,장기극륭입pET-28a원핵표체재체,연후장중조질립전화인대장간균균주Rossetea,용IPTG유도표체융합단백.융합단백선경Ni-IDA응효주순화,재면역신서란대백토제비다극륭항체,연후용불동농도적항체분별진행Western-blot실험검측항체효개.소득결과현시획득료교고효개적과승Mef2다극륭항체.
