上海交通大学学报(农业科学版)
上海交通大學學報(農業科學版)
상해교통대학학보(농업과학판)
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(AGRICULTURAL SCIENCE)
2004年
1期
1-6
,共6页
范媛媛%庞永珍%吴为胜%姚剑虹%唐克轩%武天龙
範媛媛%龐永珍%吳為勝%姚劍虹%唐剋軒%武天龍
범원원%방영진%오위성%요검홍%당극헌%무천룡
双价抗虫%半夏凝集%pta基因%cryIA(a/c)基因%载体构建%转基因植株
雙價抗蟲%半夏凝集%pta基因%cryIA(a/c)基因%載體構建%轉基因植株
쌍개항충%반하응집%pta기인%cryIA(a/c)기인%재체구건%전기인식주
用限制性内切酶Hind Ⅲ酶切分别含有CryIA(a)和CryIA(c)基因的Pgem-4zf质粒得到Ubiquitin(玉米泛素)基因启动子驱动的CryIA(a)和CryIA(c)基因表达盒,将它们分别插入到用Hind Ⅲ开环的Pcambia3300(含编码抗除草剂草丁膦的bar基因)载体上形成中间载体p3300-bt.采用Pfu高保真DNA聚合酶用PCR的方法从质粒Pbi121-pta上扩增得到含CaMV35S启动子和NOS终止子的pta基因表达盒,然后插入到用SmaⅠ切开的中间载体p3300-bt中,获得带有抗性基因的双价抗虫基因表达载体p3300-bt-pta.通过根癌农杆菌介导的叶盘法转化烟草品种百日红,获得一批抗除草剂的转基因烟草植株.
用限製性內切酶Hind Ⅲ酶切分彆含有CryIA(a)和CryIA(c)基因的Pgem-4zf質粒得到Ubiquitin(玉米汎素)基因啟動子驅動的CryIA(a)和CryIA(c)基因錶達盒,將它們分彆插入到用Hind Ⅲ開環的Pcambia3300(含編碼抗除草劑草丁膦的bar基因)載體上形成中間載體p3300-bt.採用Pfu高保真DNA聚閤酶用PCR的方法從質粒Pbi121-pta上擴增得到含CaMV35S啟動子和NOS終止子的pta基因錶達盒,然後插入到用SmaⅠ切開的中間載體p3300-bt中,穫得帶有抗性基因的雙價抗蟲基因錶達載體p3300-bt-pta.通過根癌農桿菌介導的葉盤法轉化煙草品種百日紅,穫得一批抗除草劑的轉基因煙草植株.
용한제성내절매Hind Ⅲ매절분별함유CryIA(a)화CryIA(c)기인적Pgem-4zf질립득도Ubiquitin(옥미범소)기인계동자구동적CryIA(a)화CryIA(c)기인표체합,장타문분별삽입도용Hind Ⅲ개배적Pcambia3300(함편마항제초제초정련적bar기인)재체상형성중간재체p3300-bt.채용Pfu고보진DNA취합매용PCR적방법종질립Pbi121-pta상확증득도함CaMV35S계동자화NOS종지자적pta기인표체합,연후삽입도용SmaⅠ절개적중간재체p3300-bt중,획득대유항성기인적쌍개항충기인표체재체p3300-bt-pta.통과근암농간균개도적협반법전화연초품충백일홍,획득일비항제초제적전기인연초식주.
