中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2005年
6期
497-499
,共3页
冯国和%王玉梅%刘宁%王占英%刘沛%竹上勉
馮國和%王玉梅%劉寧%王佔英%劉沛%竹上勉
풍국화%왕옥매%류저%왕점영%류패%죽상면
流行性乙型脑炎病毒%pNS4A%DNA测序%限制性内切酶分析%蛋白表达
流行性乙型腦炎病毒%pNS4A%DNA測序%限製性內切酶分析%蛋白錶達
류행성을형뇌염병독%pNS4A%DNA측서%한제성내절매분석%단백표체
目的:克隆及表达流行性乙型脑炎病毒(JEV)NS4A蛋白基因.方法:JEV JaGAr-01株感染C6/36细胞,RT-PCR法获取JEV NS4A蛋白基因并采用ABI PRSMTM310 Genetic Analyzer进行DNA测序分析,PCR克隆方法将RT-PCR产物构建于原核表达载体PET-3a的BamHI与EcoRI酶切位点并命名为pNS4A,电泳进行限制性内切酶分析.结果:JEV NS4A蛋白基因大小为446 bp,DNA测序与发表的JEV JaGAr-01株相对应的DNA序列相符合,酶切后从重组质粒释出的插入子与JEV NS4A蛋白基因大小相一致.pNS4A在原核细胞内表达的特异蛋白分子量约16 kDa,与JEV NS4A蛋白理论计算相一致.结论:获取的JEV NS4A蛋白基因来自于JaGAr-01野生株,pNS4A在大肠埃希菌中表达的蛋白产物为JEV NS4A蛋白.
目的:剋隆及錶達流行性乙型腦炎病毒(JEV)NS4A蛋白基因.方法:JEV JaGAr-01株感染C6/36細胞,RT-PCR法穫取JEV NS4A蛋白基因併採用ABI PRSMTM310 Genetic Analyzer進行DNA測序分析,PCR剋隆方法將RT-PCR產物構建于原覈錶達載體PET-3a的BamHI與EcoRI酶切位點併命名為pNS4A,電泳進行限製性內切酶分析.結果:JEV NS4A蛋白基因大小為446 bp,DNA測序與髮錶的JEV JaGAr-01株相對應的DNA序列相符閤,酶切後從重組質粒釋齣的插入子與JEV NS4A蛋白基因大小相一緻.pNS4A在原覈細胞內錶達的特異蛋白分子量約16 kDa,與JEV NS4A蛋白理論計算相一緻.結論:穫取的JEV NS4A蛋白基因來自于JaGAr-01野生株,pNS4A在大腸埃希菌中錶達的蛋白產物為JEV NS4A蛋白.
목적:극륭급표체류행성을형뇌염병독(JEV)NS4A단백기인.방법:JEV JaGAr-01주감염C6/36세포,RT-PCR법획취JEV NS4A단백기인병채용ABI PRSMTM310 Genetic Analyzer진행DNA측서분석,PCR극륭방법장RT-PCR산물구건우원핵표체재체PET-3a적BamHI여EcoRI매절위점병명명위pNS4A,전영진행한제성내절매분석.결과:JEV NS4A단백기인대소위446 bp,DNA측서여발표적JEV JaGAr-01주상대응적DNA서렬상부합,매절후종중조질립석출적삽입자여JEV NS4A단백기인대소상일치.pNS4A재원핵세포내표체적특이단백분자량약16 kDa,여JEV NS4A단백이론계산상일치.결론:획취적JEV NS4A단백기인래자우JaGAr-01야생주,pNS4A재대장애희균중표체적단백산물위JEV NS4A단백.
