CAJ | 학술논문

目的:观察D,L-聚乳酸体外降解规律和降解产物对内皮细胞生长的影响.方法:实验于2006-06/12在四川大学细胞相容性研究室完成.将D,L-聚乳酸膜在生理盐水中体外无菌降解120 d.①计算失质量率:失质量率(%)=(降解前本体的质量-降解后本体的质量)/降解前本体的质量×100%.②测定黏均相对分子质量:用乌氏黏度计外推法测降解后本体的特性黏度,特性黏度与黏均相对分子质量关系式为:η=2.21×104 M.77.③测定降解液的pH值.④乳酸标准曲线的制备:将乳酸稀释为0.16,0.08,0.048,0.032,0.016,0.008 g/mL,于262 rm的波长处测定吸光度值,对乳酸质量浓度做标准曲线.⑤将不同降解时间的降解液与内皮细胞共培养,分为3组,实验组分别加入不同降解时间的未经稀释的降解液100 μL和新鲜培养基100 μL,阴性对照组加入生理盐水100 μL和培养基100 μL,空白对照组加入培养基100 μL,各组分别培养1,2,3,4,5,6 d.采用MTT法测定内皮细胞的生长.结果:①失质量率:在最初2周内,失质量率增大较快.在20-70 d失质量率变化不大.在80～120 d失质量率快速增加.②黏均相对分子质量:从开始降解到70 d,黏均相对分子质量呈直线下降趋势,之后随时间延长而趋于平缓,且相对分子质量很小.③pH值:前30 d pH值下降很快,从6.32降到4.56;在30～70 d pH值反而有所上升,上升到5.39;之后急剧下降,在120 d时达到2.29.④乳酸的质量浓度:随降解时间延长而增大,前20 d达到5.8 g/L,70 d为16.7 g/L,120 d时达到24.4 g/L.⑤不同降解时间的降解液作用下内皮细胞的生长情况:前70 d的降解液对内皮细胞生长有促进作用,70 d后的降解液明显抑制内皮细胞生长,到120 d时降解液使内皮细胞表现显著的细胞毒性,细胞出现凋亡.结论:D,L-聚乳酸膜降解后,70 d前降解液促进内皮细胞生长,70 d后至120 d降解液对内皮细胞生长的影响从抑制作用到细胞毒性逐渐增强.本实验表明D,L-聚乳酸的降解产物在局部积累达一定浓度后对内皮细胞生长的微生态环境有极大的改变,将导致细胞毒性增强,甚至细胞凋亡. 目的:觀察D,L-聚乳痠體外降解規律和降解產物對內皮細胞生長的影響.方法:實驗于2006-06/12在四川大學細胞相容性研究室完成.將D,L-聚乳痠膜在生理鹽水中體外無菌降解120 d.①計算失質量率:失質量率(%)=(降解前本體的質量-降解後本體的質量)/降解前本體的質量×100%.②測定黏均相對分子質量:用烏氏黏度計外推法測降解後本體的特性黏度,特性黏度與黏均相對分子質量關繫式為:η=2.21×104 M.77.③測定降解液的pH值.④乳痠標準麯線的製備:將乳痠稀釋為0.16,0.08,0.048,0.032,0.016,0.008 g/mL,于262 rm的波長處測定吸光度值,對乳痠質量濃度做標準麯線.⑤將不同降解時間的降解液與內皮細胞共培養,分為3組,實驗組分彆加入不同降解時間的未經稀釋的降解液100 μL和新鮮培養基100 μL,陰性對照組加入生理鹽水100 μL和培養基100 μL,空白對照組加入培養基100 μL,各組分彆培養1,2,3,4,5,6 d.採用MTT法測定內皮細胞的生長.結果:①失質量率:在最初2週內,失質量率增大較快.在20-70 d失質量率變化不大.在80～120 d失質量率快速增加.②黏均相對分子質量:從開始降解到70 d,黏均相對分子質量呈直線下降趨勢,之後隨時間延長而趨于平緩,且相對分子質量很小.③pH值:前30 d pH值下降很快,從6.32降到4.56;在30～70 d pH值反而有所上升,上升到5.39;之後急劇下降,在120 d時達到2.29.④乳痠的質量濃度:隨降解時間延長而增大,前20 d達到5.8 g/L,70 d為16.7 g/L,120 d時達到24.4 g/L.⑤不同降解時間的降解液作用下內皮細胞的生長情況:前70 d的降解液對內皮細胞生長有促進作用,70 d後的降解液明顯抑製內皮細胞生長,到120 d時降解液使內皮細胞錶現顯著的細胞毒性,細胞齣現凋亡.結論:D,L-聚乳痠膜降解後,70 d前降解液促進內皮細胞生長,70 d後至120 d降解液對內皮細胞生長的影響從抑製作用到細胞毒性逐漸增彊.本實驗錶明D,L-聚乳痠的降解產物在跼部積纍達一定濃度後對內皮細胞生長的微生態環境有極大的改變,將導緻細胞毒性增彊,甚至細胞凋亡.
목적:관찰D,L-취유산체외강해규률화강해산물대내피세포생장적영향.방법:실험우2006-06/12재사천대학세포상용성연구실완성.장D,L-취유산막재생리염수중체외무균강해120 d.①계산실질량솔:실질량솔(%)=(강해전본체적질량-강해후본체적질량)/강해전본체적질량×100%.②측정점균상대분자질량:용오씨점도계외추법측강해후본체적특성점도,특성점도여점균상대분자질량관계식위:η=2.21×104 M.77.③측정강해액적pH치.④유산표준곡선적제비:장유산희석위0.16,0.08,0.048,0.032,0.016,0.008 g/mL,우262 rm적파장처측정흡광도치,대유산질량농도주표준곡선.⑤장불동강해시간적강해액여내피세포공배양,분위3조,실험조분별가입불동강해시간적미경희석적강해액100 μL화신선배양기100 μL,음성대조조가입생리염수100 μL화배양기100 μL,공백대조조가입배양기100 μL,각조분별배양1,2,3,4,5,6 d.채용MTT법측정내피세포적생장.결과:①실질량솔:재최초2주내,실질량솔증대교쾌.재20-70 d실질량솔변화불대.재80～120 d실질량솔쾌속증가.②점균상대분자질량:종개시강해도70 d,점균상대분자질량정직선하강추세,지후수시간연장이추우평완,차상대분자질량흔소.③pH치:전30 d pH치하강흔쾌,종6.32강도4.56;재30～70 d pH치반이유소상승,상승도5.39;지후급극하강,재120 d시체도2.29.④유산적질량농도:수강해시간연장이증대,전20 d체도5.8 g/L,70 d위16.7 g/L,120 d시체도24.4 g/L.⑤불동강해시간적강해액작용하내피세포적생장정황:전70 d적강해액대내피세포생장유촉진작용,70 d후적강해액명현억제내피세포생장,도120 d시강해액사내피세포표현현저적세포독성,세포출현조망.결론:D,L-취유산막강해후,70 d전강해액촉진내피세포생장,70 d후지120 d강해액대내피세포생장적영향종억제작용도세포독성축점증강.본실험표명D,L-취유산적강해산물재국부적루체일정농도후대내피세포생장적미생태배경유겁대적개변,장도치세포독성증강,심지세포조망.