扬州大学学报（农业与生命科学版）
颺州大學學報（農業與生命科學版）
양주대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY(AGRICULTURAL AND LIFE SCIENCE EDITION)
2007年
4期
6-9
,共4页
戴华%郑佳玉%胡茂志%陈俊华%潘志明%焦新安
戴華%鄭佳玉%鬍茂誌%陳俊華%潘誌明%焦新安
대화%정가옥%호무지%진준화%반지명%초신안
鸡%γ-干扰素%单克隆抗体%流式细胞术
鷄%γ-榦擾素%單剋隆抗體%流式細胞術
계%γ-간우소%단극륭항체%류식세포술
应用淋巴细胞杂交瘤技术,以纯化的原核表达产物His-ChIFN-γ作为免疫原,以纯化的GST-ChIFN-γ作为检测原,制备抗鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)mAb;采用ELISA、Dot-ELISA和ECL法鉴定单克隆抗体(mAb)的生物学特性.获得4株可稳定分泌抗ChIFN-γ mAb的杂交瘤细胞株1G10、2C3、3E5、3E3,其腹水ELISA效价为2×104～8.2×105;Ig亚类分别为IgG1、IgG1、IgG1和IgG2a.Dot-ELISA和ECL试验结果均表明:4株mAb只与表达ChIFN-γ的重组大肠杆菌反应,而与未表达ChIFN-γ的菌株不反应,表明4株mAb均特异性针对ChIFN-γ.鸡脾脏淋巴细胞经PMA刺激后,经固定、破膜,用mAb 2C3标记,利用流式细胞术可成功地检测到表达ChIFN-γ的T淋巴细胞.mAb为家禽的免疫检测、免疫细胞功能分析和免疫调节等研究提供依据.
應用淋巴細胞雜交瘤技術,以純化的原覈錶達產物His-ChIFN-γ作為免疫原,以純化的GST-ChIFN-γ作為檢測原,製備抗鷄γ-榦擾素(ChIFN-γ)mAb;採用ELISA、Dot-ELISA和ECL法鑒定單剋隆抗體(mAb)的生物學特性.穫得4株可穩定分泌抗ChIFN-γ mAb的雜交瘤細胞株1G10、2C3、3E5、3E3,其腹水ELISA效價為2×104～8.2×105;Ig亞類分彆為IgG1、IgG1、IgG1和IgG2a.Dot-ELISA和ECL試驗結果均錶明:4株mAb隻與錶達ChIFN-γ的重組大腸桿菌反應,而與未錶達ChIFN-γ的菌株不反應,錶明4株mAb均特異性針對ChIFN-γ.鷄脾髒淋巴細胞經PMA刺激後,經固定、破膜,用mAb 2C3標記,利用流式細胞術可成功地檢測到錶達ChIFN-γ的T淋巴細胞.mAb為傢禽的免疫檢測、免疫細胞功能分析和免疫調節等研究提供依據.
응용림파세포잡교류기술,이순화적원핵표체산물His-ChIFN-γ작위면역원,이순화적GST-ChIFN-γ작위검측원,제비항계γ-간우소(ChIFN-γ)mAb;채용ELISA、Dot-ELISA화ECL법감정단극륭항체(mAb)적생물학특성.획득4주가은정분비항ChIFN-γ mAb적잡교류세포주1G10、2C3、3E5、3E3,기복수ELISA효개위2×104～8.2×105;Ig아류분별위IgG1、IgG1、IgG1화IgG2a.Dot-ELISA화ECL시험결과균표명:4주mAb지여표체ChIFN-γ적중조대장간균반응,이여미표체ChIFN-γ적균주불반응,표명4주mAb균특이성침대ChIFN-γ.계비장림파세포경PMA자격후,경고정、파막,용mAb 2C3표기,이용류식세포술가성공지검측도표체ChIFN-γ적T림파세포.mAb위가금적면역검측、면역세포공능분석화면역조절등연구제공의거.
