CAJ | 학술논문

背景:由于血管内皮细胞是形成血管网络的主要功能细胞,因此通过在支架复合体中复合血管内皮细胞的方式促进再造心肌的血管化足目前研究的热点.目的:以细胞外基质凝胶为支架混合人脐静脉内皮细胞,观察内皮细胞在细胞外摹质凝胶中的生长过程及发育情况.设计、时间及地点:观察实验,于2006-11/2008-01在解放军军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究室实验室完成.材料:取健康剖腹产孕妇的脐带分离培养人脐静脉内皮细胞.取新生SD大鼠鼠尾制备I型液态胶原溶液.方法:将2.4 g/L液态l型胶原与2×M199培养基等比例混合,用0.1 mol/L NaOH调为中性,加入分离培养3 d的人脐静脉内皮细胞,使其终浓度为4×109L-1,再加入200 g/L的Matrigel基质凝胶.最后加入有静态拉伸力的组织工程化片层所需的模具中,构建组织工程化内皮细胞片层.主要观察指标:体外培养20 d后光学显微镜、常规苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色和透射电镜观察.结果:显微镜下观察可见内皮细胞在细胞外基质凝胶中形成明显的管腔样、分支样、类似血管样结构.通过组织学和免疫组织化学的检测,证实其确为来源于人脐静脉中分离培养的内皮细胞.电镜观察可见随着时间的延长,在组织工程化内皮细胞片层中,内皮细胞口J形成管腔.细胞间有紧密连接.结论:以细胞外基质凝胶为支架混合人脐静脉内皮细胞构建的组织工程化内皮细胞片层中具有类似血管样结构.
배경:유우혈관내피세포시형성혈관망락적주요공능세포,인차통과재지가복합체중복합혈관내피세포적방식촉진재조심기적혈관화족목전연구적열점.목적:이세포외기질응효위지가혼합인제정맥내피세포,관찰내피세포재세포외모질응효중적생장과정급발육정황.설계、시간급지점:관찰실험,우2006-11/2008-01재해방군군사의학과학원기출의학연구소조직공정연구실실험실완성.재료:취건강부복산잉부적제대분리배양인제정맥내피세포.취신생SD대서서미제비I형액태효원용액.방법:장2.4 g/L액태l형효원여2×M199배양기등비례혼합,용0.1 mol/L NaOH조위중성,가입분리배양3 d적인제정맥내피세포,사기종농도위4×109L-1,재가입200 g/L적Matrigel기질응효.최후가입유정태랍신력적조직공정화편층소수적모구중,구건조직공정화내피세포편층.주요관찰지표:체외배양20 d후광학현미경、상규소목정-이홍염색、면역조직화학염색화투사전경관찰.결과:현미경하관찰가견내피세포재세포외기질응효중형성명현적관강양、분지양、유사혈관양결구.통과조직학화면역조직화학적검측,증실기학위래원우인제정맥중분리배양적내피세포.전경관찰가견수착시간적연장,재조직공정화내피세포편층중,내피세포구J형성관강.세포간유긴밀련접.결론:이세포외기질응효위지가혼합인제정맥내피세포구건적조직공정화내피세포편층중구유유사혈관양결구.