南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2008年
7期
1210-1213
,共4页
陈熙%任景慧%郭辉%林琳华%姚秋璇
陳熙%任景慧%郭輝%林琳華%姚鞦璇
진희%임경혜%곽휘%림림화%요추선
实时PCR%游离胎儿DNA%β-地中海贫血%产前诊断
實時PCR%遊離胎兒DNA%β-地中海貧血%產前診斷
실시PCR%유리태인DNA%β-지중해빈혈%산전진단
目的 通过检测孕妇外周血中的游离胎儿DNA来筛选重型β-地中海贫血胎儿.方法 选择行产前基因诊断的夫妇6对,孕妇孕周23～26周.血液学检查:胎儿的父亲均为β-地中海贫血17M/N型,孕妇本人为携带除17M/N型之外的另一β-地中海贫血突变类型.针对CD17(A→T)无义突变,设计β-珠蛋白肽链上该等位基因的一对特异性引物和通过cycling probe法分别设计检测正常基因序列和基因突变位点的两条荧光探针,分别用FAM和HEX荧光标记.结合RT-PCR技术检测孕妇外周血中游离胎儿DNA,诊断胎儿是否遗传了其父亲的β地中海贫血17M/N碱基突变位点.同时与脐血血液学检查所诊断的胎儿地贫基因型对照.结果 提取的6例孕妇血浆DNA模板中有3例同时显示FAM和HEX荧光信号值阳性结果,即这3例孕妇的胎儿遗传了父亲β-珠蛋白肽链上CD17位点的突变碱基(A→T).另外3例孕妇血浆DNA模板的FAM信号值阳性,HEX信号值阴性,即所孕胎儿没有遗传父亲的CD17位点的突变碱基.结论 利用RT-PCR和cycling probe技术检测孕妇外周血中的游离胎儿DNA可用来筛选患重型地中海贫血的胎儿.
目的 通過檢測孕婦外週血中的遊離胎兒DNA來篩選重型β-地中海貧血胎兒.方法 選擇行產前基因診斷的伕婦6對,孕婦孕週23～26週.血液學檢查:胎兒的父親均為β-地中海貧血17M/N型,孕婦本人為攜帶除17M/N型之外的另一β-地中海貧血突變類型.針對CD17(A→T)無義突變,設計β-珠蛋白肽鏈上該等位基因的一對特異性引物和通過cycling probe法分彆設計檢測正常基因序列和基因突變位點的兩條熒光探針,分彆用FAM和HEX熒光標記.結閤RT-PCR技術檢測孕婦外週血中遊離胎兒DNA,診斷胎兒是否遺傳瞭其父親的β地中海貧血17M/N堿基突變位點.同時與臍血血液學檢查所診斷的胎兒地貧基因型對照.結果 提取的6例孕婦血漿DNA模闆中有3例同時顯示FAM和HEX熒光信號值暘性結果,即這3例孕婦的胎兒遺傳瞭父親β-珠蛋白肽鏈上CD17位點的突變堿基(A→T).另外3例孕婦血漿DNA模闆的FAM信號值暘性,HEX信號值陰性,即所孕胎兒沒有遺傳父親的CD17位點的突變堿基.結論 利用RT-PCR和cycling probe技術檢測孕婦外週血中的遊離胎兒DNA可用來篩選患重型地中海貧血的胎兒.
목적 통과검측잉부외주혈중적유리태인DNA래사선중형β-지중해빈혈태인.방법 선택행산전기인진단적부부6대,잉부잉주23～26주.혈액학검사:태인적부친균위β-지중해빈혈17M/N형,잉부본인위휴대제17M/N형지외적령일β-지중해빈혈돌변류형.침대CD17(A→T)무의돌변,설계β-주단백태련상해등위기인적일대특이성인물화통과cycling probe법분별설계검측정상기인서렬화기인돌변위점적량조형광탐침,분별용FAM화HEX형광표기.결합RT-PCR기술검측잉부외주혈중유리태인DNA,진단태인시부유전료기부친적β지중해빈혈17M/N감기돌변위점.동시여제혈혈액학검사소진단적태인지빈기인형대조.결과 제취적6례잉부혈장DNA모판중유3례동시현시FAM화HEX형광신호치양성결과,즉저3례잉부적태인유전료부친β-주단백태련상CD17위점적돌변감기(A→T).령외3례잉부혈장DNA모판적FAM신호치양성,HEX신호치음성,즉소잉태인몰유유전부친적CD17위점적돌변감기.결론 이용RT-PCR화cycling probe기술검측잉부외주혈중적유리태인DNA가용래사선환중형지중해빈혈적태인.
