CAJ | 학술논문

背景:P21CIp/WAF1、P27Kip1是两种重要的细胞周期的负调控因子,增殖细胞核抗原是反映干细胞增殖的指标.目的:观察体外诱导人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化过程中P21Cip/WAF1,P27KIp1及增殖细胞核抗原的表达变化.设计、时间及地点:细胞学基因水平观察,于2006-12/2007-06在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心实验室完成.材料:骨髓来源于中山大学附属第二医院行骨髓穿刺的健康供者.方法:全骨髓贴壁筛选法体外分离培养人骨髓间充质干细胞,传至第5代后,加入含20 μg/L肝细胞生长因子、10 μg/L成纤维细胞生长因子4的opti-MEM I低血清培养基向肝细胞诱导分化.主要观察指标:诱导后RT-PCR检测细胞内P21Cip/WAF1,P27 KIp1及增殖细胞核抗原基因mRNA的表达.结果:骨髓间充质干细胞向肝细胞定向诱导后0,1,3,5,7 d,细胞内P21CIp/WAF1 mRNA表达的相对量逐渐升高(P＜0.01),P27Kip1 mRNA表达的相对量无明显差异(P＞0.05),增殖细胞核抗原mRNA表达的相对量除诱导后0,1 d无明显差异(P＞0.05)外,其余各时间点均逐渐降低(P＜0.01).结论:P21 CIp/WAF1高表达抑制了骨髓间充质干细胞增殖,同时在其向肝细胞分化过程中起一定调控作用,P27KIp1可能并不起作用,增殖细胞核抗原的表达则与P21Cip/WAF1相反,呈逐步减少趋势.
배경:P21CIp/WAF1、P27Kip1시량충중요적세포주기적부조공인자,증식세포핵항원시반영간세포증식적지표.목적:관찰체외유도인골수간충질간세포향간세포분화과정중P21Cip/WAF1,P27KIp1급증식세포핵항원적표체변화.설계、시간급지점:세포학기인수평관찰,우2006-12/2007-06재중산대학부속제이의원림백흔의학연구중심실험실완성.재료:골수래원우중산대학부속제이의원행골수천자적건강공자.방법:전골수첩벽사선법체외분리배양인골수간충질간세포,전지제5대후,가입함20 μg/L간세포생장인자、10 μg/L성섬유세포생장인자4적opti-MEM I저혈청배양기향간세포유도분화.주요관찰지표:유도후RT-PCR검측세포내P21Cip/WAF1,P27 KIp1급증식세포핵항원기인mRNA적표체.결과:골수간충질간세포향간세포정향유도후0,1,3,5,7 d,세포내P21CIp/WAF1 mRNA표체적상대량축점승고(P＜0.01),P27Kip1 mRNA표체적상대량무명현차이(P＞0.05),증식세포핵항원mRNA표체적상대량제유도후0,1 d무명현차이(P＞0.05)외,기여각시간점균축점강저(P＜0.01).결론:P21 CIp/WAF1고표체억제료골수간충질간세포증식,동시재기향간세포분화과정중기일정조공작용,P27KIp1가능병불기작용,증식세포핵항원적표체칙여P21Cip/WAF1상반,정축보감소추세.