CAJ | 학술논문

为制备蓝舌病病毒(BTV)血清17型VP2蛋白的单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究用原核表达系统部分重叠表达的两段VP2蛋白共同免疫BALB/c小鼠,采用细胞融合技术获得杂交瘤细胞,通过以重组VP2蛋为白包被抗原的间接ELISA筛选获得2株稳定分泌抗BTV17 VP2蛋白的MAbs杂交瘤细胞株,分别命名为3F4和4H10.Ig亚类鉴定2株MAbs均为IgG1/k链.Western blot证明,2株MAbs均能识别重组VP2蛋白.间接免疫荧光试验表明:2株MAbs均与BTV17呈阳性反应,其中MAb 3F4与BTV1、BTV2、BTV3、BTV5、BTV8、BTV11、BTV13、BTV16、BTV23、茨城病病毒(IBAV)、牛轮状病毒(BRV)、牛呼肠孤病毒(RV)均呈阴性反应,但与BTV10和BTV24呈弱阳性反应.利用合成多肽对VP2抗原表位鉴定结果表明,MAb 3F4识别的抗原表位为540DPWNNR545,MAb 4H10识别的抗原表位为540DPWNNRA546.本研究结果为建立BTV17型特异性检测方法及VP2功能研究奠定了基础.
위제비람설병병독(BTV)혈청17형VP2단백적단극륭항체(MAb)급감정기항원표위,본연구용원핵표체계통부분중첩표체적량단VP2단백공동면역BALB/c소서,채용세포융합기술획득잡교류세포,통과이중조VP2단위백포피항원적간접ELISA사선획득2주은정분비항BTV17 VP2단백적MAbs잡교류세포주,분별명명위3F4화4H10.Ig아류감정2주MAbs균위IgG1/k련.Western blot증명,2주MAbs균능식별중조VP2단백.간접면역형광시험표명:2주MAbs균여BTV17정양성반응,기중MAb 3F4여BTV1、BTV2、BTV3、BTV5、BTV8、BTV11、BTV13、BTV16、BTV23、자성병병독(IBAV)、우륜상병독(BRV)、우호장고병독(RV)균정음성반응,단여BTV10화BTV24정약양성반응.이용합성다태대VP2항원표위감정결과표명,MAb 3F4식별적항원표위위540DPWNNR545,MAb 4H10식별적항원표위위540DPWNNRA546.본연구결과위건립BTV17형특이성검측방법급VP2공능연구전정료기출.