CAJ | 학술논문

目的研究富血小板血浆(PRP)对人成骨样细胞MG63增殖能力的影响,探讨PRP的生物学功能.方法采集健康志愿者的静脉血,两次离心法制备PRP,氯化钙加人凝血酶激活后离心提取PRP萃取液.碱性磷酸酶(ALP)染色检测不同体积分数PRP(0、1％、2％、3％)对MG63分化活性的影响,碘化丙啶(PI)荧光染色观察PRP作用下MG63细胞形态的变化,免疫细胞化学检测PRP对MG63表达转化生长因子-β(TGF-β)的影响,扫描电子显微镜(SEM)观察PRP对MG63在人工骨材料表面生长情况的影响,CCK-8法检测PRP对MG63增殖活性的影响,流式细胞术(FCM)检测经PRP培养后不同时间MG63的细胞周期,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测PRP作用下MG63中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ) mRNA的表达量.结果 ALP检测见3％PRP组ALP阳性细胞染色最深,并随体积分数的增加染色强度增加,且PRP组细胞均出现不同程度的脱片现象.PI荧光染色见PRP组细胞核荧光染色较对照组增强.免疫细胞化学检测见3％PRP组TGF-β表达量最高(P＜0.05).SEM观察:PRP组材料表面MG63密集,生长状态良好.CCK-8法测定细胞增殖活性,显示4.8％PRP组吸光度A450nm值高于对照组(P＜0.05).FCM检测表明:PRP组第2天S期细胞百分比高于对照组(P＜0.05);第10天PRP组G0/G1期细胞百分比高于对照组(P＜0.05)；除第6天外,PRP组G2/M期细胞百分比均高于对照组.RT-PCR结果表明:PRP组MG63的Col-Ⅰ mRNA表达量较对照组明显上调.结论适宜体积分数的PRP对MG63的增殖、迁移和相关蛋白、基因的表达有促进作用,PRP具有统一、协调细胞生物学行为的作用.
목적 연구부혈소판혈장(PRP)대인성골양세포MG63증식능력적영향,탐토PRP적생물학공능.방법 채집건강지원자적정맥혈,량차리심법제비PRP,록화개가인응혈매격활후리심제취PRP췌취액.감성린산매(ALP)염색검측불동체적분수PRP(0、1％、2％、3％)대MG63분화활성적영향,전화병정(PI)형광염색관찰PRP작용하MG63세포형태적변화,면역세포화학검측PRP대MG63표체전화생장인자-β(TGF-β)적영향,소묘전자현미경(SEM)관찰PRP대MG63재인공골재료표면생장정황적영향,CCK-8법검측PRP대MG63증식활성적영향,류식세포술(FCM)검측경PRP배양후불동시간MG63적세포주기,역전록취합매련반응(RT-PCR)검측PRP작용하MG63중Ⅰ형효원(Col-Ⅰ) mRNA적표체량.결과 ALP검측견3％PRP조ALP양성세포염색최심,병수체적분수적증가염색강도증가,차PRP조세포균출현불동정도적탈편현상.PI형광염색견PRP조세포핵형광염색교대조조증강.면역세포화학검측견3％PRP조TGF-β표체량최고(P＜0.05).SEM관찰:PRP조재료표면MG63밀집,생장상태량호.CCK-8법측정세포증식활성,현시4.8％PRP조흡광도A450nm치고우대조조(P＜0.05).FCM검측표명:PRP조제2천S기세포백분비고우대조조(P＜0.05);제10천PRP조G0/G1기세포백분비고우대조조(P＜0.05)；제제6천외,PRP조G2/M기세포백분비균고우대조조.RT-PCR결과표명:PRP조MG63적Col-Ⅰ mRNA표체량교대조조명현상조.결론 괄의체적분수적PRP대MG63적증식、천이화상관단백、기인적표체유촉진작용,PRP구유통일、협조세포생물학행위적작용.