中国输血杂志
中國輸血雜誌
중국수혈잡지
CHINESE JOURNAL OF BLOOD TRANSFUSION
2006年
3期
181-184
,共4页
郑岚%黄宇闻%曹文俊%倪小菊%莫琴%王迅%钱开诚
鄭嵐%黃宇聞%曹文俊%倪小菊%莫琴%王迅%錢開誠
정람%황우문%조문준%예소국%막금%왕신%전개성
光化学法,亚甲蓝%病毒/灭活%HCV%基因组%RT-PCR
光化學法,亞甲藍%病毒/滅活%HCV%基因組%RT-PCR
광화학법,아갑람%병독/멸활%HCV%기인조%RT-PCR
目的研究丙型肝炎病毒(HCV)基因组核酸在亚甲蓝光化学法(methelene blue photochemistry,MB-P)灭活病毒前后的变化,在全基因组水平分析MB-P对基因组各结构区段的降解作用.方法含HCV的血浆中加入终浓度为1.0μmol/L的MB,经约30000Lux强度的荧光照射后,在不同作用时间点取样;将HCV全基因组序列分为互相重叠的8个区段,分别进行RT-PCR,分析基因组核酸的完整性;同时运用实时定量PCR(real time-PCR,RT-PCR)技术观察核酸降解的动力学变化.结果基因组各区段RT-PCR结果发现,经过不同的光照时间,HCV基因组各区段的稳定性不同,第2、4、5、6区段对MB-P作用较敏感,基因组5'端区段和3'端区段经MB-P作用后的稳定性高于基因组其它区段;RT-PCR结果显示,随着光照时间延长,可被检测到的病毒核酸拷贝数逐渐下降.结论MB-P灭活过程中HCV基因组核酸被降解,而且基因组不同区段对光化学作用的反应性不同,提示RNA降解可能是病毒灭活的重要机制;检测病毒核酸稳定性以监测病毒灭活具有一定临床实用价值.
目的研究丙型肝炎病毒(HCV)基因組覈痠在亞甲藍光化學法(methelene blue photochemistry,MB-P)滅活病毒前後的變化,在全基因組水平分析MB-P對基因組各結構區段的降解作用.方法含HCV的血漿中加入終濃度為1.0μmol/L的MB,經約30000Lux彊度的熒光照射後,在不同作用時間點取樣;將HCV全基因組序列分為互相重疊的8箇區段,分彆進行RT-PCR,分析基因組覈痠的完整性;同時運用實時定量PCR(real time-PCR,RT-PCR)技術觀察覈痠降解的動力學變化.結果基因組各區段RT-PCR結果髮現,經過不同的光照時間,HCV基因組各區段的穩定性不同,第2、4、5、6區段對MB-P作用較敏感,基因組5'耑區段和3'耑區段經MB-P作用後的穩定性高于基因組其它區段;RT-PCR結果顯示,隨著光照時間延長,可被檢測到的病毒覈痠拷貝數逐漸下降.結論MB-P滅活過程中HCV基因組覈痠被降解,而且基因組不同區段對光化學作用的反應性不同,提示RNA降解可能是病毒滅活的重要機製;檢測病毒覈痠穩定性以鑑測病毒滅活具有一定臨床實用價值.
목적연구병형간염병독(HCV)기인조핵산재아갑람광화학법(methelene blue photochemistry,MB-P)멸활병독전후적변화,재전기인조수평분석MB-P대기인조각결구구단적강해작용.방법함HCV적혈장중가입종농도위1.0μmol/L적MB,경약30000Lux강도적형광조사후,재불동작용시간점취양;장HCV전기인조서렬분위호상중첩적8개구단,분별진행RT-PCR,분석기인조핵산적완정성;동시운용실시정량PCR(real time-PCR,RT-PCR)기술관찰핵산강해적동역학변화.결과기인조각구단RT-PCR결과발현,경과불동적광조시간,HCV기인조각구단적은정성불동,제2、4、5、6구단대MB-P작용교민감,기인조5'단구단화3'단구단경MB-P작용후적은정성고우기인조기타구단;RT-PCR결과현시,수착광조시간연장,가피검측도적병독핵산고패수축점하강.결론MB-P멸활과정중HCV기인조핵산피강해,이차기인조불동구단대광화학작용적반응성불동,제시RNA강해가능시병독멸활적중요궤제;검측병독핵산은정성이감측병독멸활구유일정림상실용개치.
