食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2007年
1期
205-208
,共4页
高绪文%陈辉%贾润清%姚立红%马长伟%张智清
高緒文%陳輝%賈潤清%姚立紅%馬長偉%張智清
고서문%진휘%가윤청%요립홍%마장위%장지청
乳酸菌%干扰素%融合蛋白%抗病毒
乳痠菌%榦擾素%融閤蛋白%抗病毒
유산균%간우소%융합단백%항병독
用乳酸菌表达有药用价值的生物学活性多肽,是当前国际上的研究热点之,对开发新的功能性食品具有广阔的前景.本文应用PCR方法将人干扰素IFN-α-2b基因与IgG Fc基因连接,并引入一段柔性连接肽,构建了融合蛋白基因IFN-IgG Fc,将融合蛋白基因克隆到原核表达载体pSC111 AE中,转化乳酸乳杆菌ATCC393进行诱导表达及鉴定,并研究了融合蛋白的生物学活性.结果表明,通过Western-Blot方法在表达上清液检测出干扰素融合蛋白,ELISA测定表明两段多肽能够保持各自的构象,基因工程乳酸菌表达的上清液可以诱导WISH细胞产生明显的抗VSV病毒的活性,其活性为1.71×103IU/ml.本文首次构建并在大肠杆菌和乳酸菌表达了IFN-IgG Fc融合蛋白,获得了能产生人干扰素的乳酸菌株,为基因工程乳酸菌及相关药物的开发研究奠定了基础.
用乳痠菌錶達有藥用價值的生物學活性多肽,是噹前國際上的研究熱點之,對開髮新的功能性食品具有廣闊的前景.本文應用PCR方法將人榦擾素IFN-α-2b基因與IgG Fc基因連接,併引入一段柔性連接肽,構建瞭融閤蛋白基因IFN-IgG Fc,將融閤蛋白基因剋隆到原覈錶達載體pSC111 AE中,轉化乳痠乳桿菌ATCC393進行誘導錶達及鑒定,併研究瞭融閤蛋白的生物學活性.結果錶明,通過Western-Blot方法在錶達上清液檢測齣榦擾素融閤蛋白,ELISA測定錶明兩段多肽能夠保持各自的構象,基因工程乳痠菌錶達的上清液可以誘導WISH細胞產生明顯的抗VSV病毒的活性,其活性為1.71×103IU/ml.本文首次構建併在大腸桿菌和乳痠菌錶達瞭IFN-IgG Fc融閤蛋白,穫得瞭能產生人榦擾素的乳痠菌株,為基因工程乳痠菌及相關藥物的開髮研究奠定瞭基礎.
용유산균표체유약용개치적생물학활성다태,시당전국제상적연구열점지,대개발신적공능성식품구유엄활적전경.본문응용PCR방법장인간우소IFN-α-2b기인여IgG Fc기인련접,병인입일단유성련접태,구건료융합단백기인IFN-IgG Fc,장융합단백기인극륭도원핵표체재체pSC111 AE중,전화유산유간균ATCC393진행유도표체급감정,병연구료융합단백적생물학활성.결과표명,통과Western-Blot방법재표체상청액검측출간우소융합단백,ELISA측정표명량단다태능구보지각자적구상,기인공정유산균표체적상청액가이유도WISH세포산생명현적항VSV병독적활성,기활성위1.71×103IU/ml.본문수차구건병재대장간균화유산균표체료IFN-IgG Fc융합단백,획득료능산생인간우소적유산균주,위기인공정유산균급상관약물적개발연구전정료기출.