幽门螺杆菌Ⅳ型分泌系统HP0527-C基因的克隆表达及其生物学功能的初步研究
유문라간균Ⅳ형분비계통HP0527-C기인적극륭표체급기생물학공능적초보연구
Cloning,Expressing and Analysis of Biological Function of HP0527-C of Type IV Secretion System in Helicobacter Pylori
  • 万方数据
    中国生物工程杂志 중국생물공정잡지
    JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
    2008年 11期 82-88 ,共7页

    母润红%邵世和%马方%王华%崔蕾蕾%钟桥%鞠小丽%董苏荣

    모윤홍%소세화%마방%왕화%최뢰뢰%종교%국소려%동소영

    幽门螺杆菌%克隆表达%细胞因子%细胞增殖 幽門螺桿菌%剋隆錶達%細胞因子%細胞增殖
    유문라간균%극륭표체%세포인자%세포증식
    为克隆表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)NCTC 11637 hp0527-c基因,探讨其生物学功能.设计引物扩增,T-A克隆,测序正确后构建表达载体pET-28a-hp0527-c,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达后以Ni2+-NTA柱获得纯度为98%重组蛋白.经Western blot鉴定正确后,免疫新西兰大白兔获得了较高滴度的多克隆抗体;将重组蛋白作用于BGC-823细胞,RT-PCR检测细胞IL-8mRNA表达增高;同时用MTT法来检测重组蛋白对细胞增殖的影响,结果表明其活性呈现一定量的时间和剂量依赖性.已成功克隆了HP0527-C的重组蛋白,初步探讨了其与细胞之间的相互作用,为进一步阐明H.pylori致病机制奠定了基础.
    위극륭표체유문라간균(Helicobacter pylori,H.pylori)NCTC 11637 hp0527-c기인,탐토기생물학공능.설계인물확증,T-A극륭,측서정학후구건표체재체pET-28a-hp0527-c,전화대장간균BL21,경IPTG유도표체후이Ni2+-NTA주획득순도위98%중조단백.경Western blot감정정학후,면역신서란대백토획득료교고적도적다극륭항체;장중조단백작용우BGC-823세포,RT-PCR검측세포IL-8mRNA표체증고;동시용MTT법래검측중조단백대세포증식적영향,결과표명기활성정현일정량적시간화제량의뢰성.이성공극륭료HP0527-C적중조단백,초보탐토료기여세포지간적상호작용,위진일보천명H.pylori치병궤제전정료기출.
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