安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2009年
2期
522-524
,共3页
李恭贺%宁淑芳%王世凯%何宝祥%蒋和生
李恭賀%寧淑芳%王世凱%何寶祥%蔣和生
리공하%저숙방%왕세개%하보상%장화생
水牛%克隆%序列分析
水牛%剋隆%序列分析
수우%극륭%서렬분석
[目的]克隆广西水牛ghrelin 的cDNA并对其进行序列分析.[方法]以广西沼泽型水牛的真胃底组织总RNA为模板,用特异性引物扩增ghrelin的cDNA.扩增产物经凝胶回收纯化后与pMD 18-T连接并转化大肠杆菌DH5α,转化产物经PCR和双酶切鉴定后筛选出阳性克隆,阳性克隆经5×1 ml LB液体培养基培养鉴定后测序.[结果]成功获得了广西水牛ghrelin 的cDNA,该片段长339 bp,编码113个氨基酸.BLAST分析结果表明,该片段与黄牛前原ghrelin基因仅有6个碱基的差异,同源性为98.2%;而两者ghrelin均由27个氨基酸组成,序列同源性为100%.[结论]为进一步研究ghrelin基因的生物学功能提了供理论基础.
[目的]剋隆廣西水牛ghrelin 的cDNA併對其進行序列分析.[方法]以廣西沼澤型水牛的真胃底組織總RNA為模闆,用特異性引物擴增ghrelin的cDNA.擴增產物經凝膠迴收純化後與pMD 18-T連接併轉化大腸桿菌DH5α,轉化產物經PCR和雙酶切鑒定後篩選齣暘性剋隆,暘性剋隆經5×1 ml LB液體培養基培養鑒定後測序.[結果]成功穫得瞭廣西水牛ghrelin 的cDNA,該片段長339 bp,編碼113箇氨基痠.BLAST分析結果錶明,該片段與黃牛前原ghrelin基因僅有6箇堿基的差異,同源性為98.2%;而兩者ghrelin均由27箇氨基痠組成,序列同源性為100%.[結論]為進一步研究ghrelin基因的生物學功能提瞭供理論基礎.
[목적]극륭엄서수우ghrelin 적cDNA병대기진행서렬분석.[방법]이엄서소택형수우적진위저조직총RNA위모판,용특이성인물확증ghrelin적cDNA.확증산물경응효회수순화후여pMD 18-T련접병전화대장간균DH5α,전화산물경PCR화쌍매절감정후사선출양성극륭,양성극륭경5×1 ml LB액체배양기배양감정후측서.[결과]성공획득료엄서수우ghrelin 적cDNA,해편단장339 bp,편마113개안기산.BLAST분석결과표명,해편단여황우전원ghrelin기인부유6개감기적차이,동원성위98.2%;이량자ghrelin균유27개안기산조성,서렬동원성위100%.[결론]위진일보연구ghrelin기인적생물학공능제료공이론기출.