微生物学杂志
微生物學雜誌
미생물학잡지
JOURNAL OF MICROBIOLOGY
2009年
4期
67-70
,共4页
丁存宝%刘海燕%贾长虹%张俊杰
丁存寶%劉海燕%賈長虹%張俊傑
정존보%류해연%가장홍%장준걸
几丁质酶%分离纯化%抗真菌活性
幾丁質酶%分離純化%抗真菌活性
궤정질매%분리순화%항진균활성
以实验室筛选的海洋产几丁质酶短芽胞杆菌属(Bacillus brevis sp.)菌株Bspl,经往复式摇床振荡培养96 h后,发酵液先后采取了75%的硫酸铵盐析、透析、几丁质亲和层析、SDS-PAGE等方法对几丁质粗酶液进行分离纯化和鉴定.几丁质亲和层析一步纯化后,经过SDS-PAGE电泳测定该酶的分子量为23 ku,其比活力为86.65,纯化倍数为1.707、产率为32.1%.纯化的几丁质酶能抑制病原真菌的生长,对病原真菌的拮抗作用具有广谱性.同时研究了几丁质酶的稳定性,以胶态几丁质为底物,分离的几丁质酶在pH 7.5,55.0℃左右具有最大酶活性;Zn2+、Cu2+和Hg2+能强烈抑制几丁质酶活性;Ni+和EDTA抑制20%～40%;然而5mmol/L CO22+ 可以使几丁质酶活性提高1.4倍;Mg2+、Ca2+等也能使酶活性增加.
以實驗室篩選的海洋產幾丁質酶短芽胞桿菌屬(Bacillus brevis sp.)菌株Bspl,經往複式搖床振盪培養96 h後,髮酵液先後採取瞭75%的硫痠銨鹽析、透析、幾丁質親和層析、SDS-PAGE等方法對幾丁質粗酶液進行分離純化和鑒定.幾丁質親和層析一步純化後,經過SDS-PAGE電泳測定該酶的分子量為23 ku,其比活力為86.65,純化倍數為1.707、產率為32.1%.純化的幾丁質酶能抑製病原真菌的生長,對病原真菌的拮抗作用具有廣譜性.同時研究瞭幾丁質酶的穩定性,以膠態幾丁質為底物,分離的幾丁質酶在pH 7.5,55.0℃左右具有最大酶活性;Zn2+、Cu2+和Hg2+能彊烈抑製幾丁質酶活性;Ni+和EDTA抑製20%～40%;然而5mmol/L CO22+ 可以使幾丁質酶活性提高1.4倍;Mg2+、Ca2+等也能使酶活性增加.
이실험실사선적해양산궤정질매단아포간균속(Bacillus brevis sp.)균주Bspl,경왕복식요상진탕배양96 h후,발효액선후채취료75%적류산안염석、투석、궤정질친화층석、SDS-PAGE등방법대궤정질조매액진행분리순화화감정.궤정질친화층석일보순화후,경과SDS-PAGE전영측정해매적분자량위23 ku,기비활력위86.65,순화배수위1.707、산솔위32.1%.순화적궤정질매능억제병원진균적생장,대병원진균적길항작용구유엄보성.동시연구료궤정질매적은정성,이효태궤정질위저물,분리적궤정질매재pH 7.5,55.0℃좌우구유최대매활성;Zn2+、Cu2+화Hg2+능강렬억제궤정질매활성;Ni+화EDTA억제20%～40%;연이5mmol/L CO22+ 가이사궤정질매활성제고1.4배;Mg2+、Ca2+등야능사매활성증가.
