海南医学
海南醫學
해남의학
HAINAN MEDICAL JOURNAL
2009年
12期
10-12
,共3页
小鼠IL-17%RT-PCR%克隆
小鼠IL-17%RT-PCR%剋隆
소서IL-17%RT-PCR%극륭
目的 克隆小鼠IL-17(mIL-17)基因编码区并构建其真核载体.方法 将10 ug LPS和等体积的完全福氏乳化后免疫C57BL/6小鼠,7 d后,取小鼠脾脏,提取脾细胞总RNA,通过RT-PCR扩增mIL-17基因全长编码区并将其克隆至pcDNA3.1载体.菌落PCR筛选阳性克隆,限制性内切酶消化和序列分析进行鉴定.结果构建的重组载体中含有mIL-17基因编码区的全长序列,与NCBI公布的序列一致.结论 获得mIL-17基因并构建了其真核表达载体,为研究IL-17在自身免疫性疾病中的作用奠定了基础.
目的 剋隆小鼠IL-17(mIL-17)基因編碼區併構建其真覈載體.方法 將10 ug LPS和等體積的完全福氏乳化後免疫C57BL/6小鼠,7 d後,取小鼠脾髒,提取脾細胞總RNA,通過RT-PCR擴增mIL-17基因全長編碼區併將其剋隆至pcDNA3.1載體.菌落PCR篩選暘性剋隆,限製性內切酶消化和序列分析進行鑒定.結果構建的重組載體中含有mIL-17基因編碼區的全長序列,與NCBI公佈的序列一緻.結論 穫得mIL-17基因併構建瞭其真覈錶達載體,為研究IL-17在自身免疫性疾病中的作用奠定瞭基礎.
목적 극륭소서IL-17(mIL-17)기인편마구병구건기진핵재체.방법 장10 ug LPS화등체적적완전복씨유화후면역C57BL/6소서,7 d후,취소서비장,제취비세포총RNA,통과RT-PCR확증mIL-17기인전장편마구병장기극륭지pcDNA3.1재체.균락PCR사선양성극륭,한제성내절매소화화서렬분석진행감정.결과구건적중조재체중함유mIL-17기인편마구적전장서렬,여NCBI공포적서렬일치.결론 획득mIL-17기인병구건료기진핵표체재체,위연구IL-17재자신면역성질병중적작용전정료기출.