中国医药生物技术
中國醫藥生物技術
중국의약생물기술
CHINESE MEDICINAL BIOTECHNOLOGY
2010年
3期
171-176
,共6页
黄云艳%贾春平%刘美英%金庆辉%赵建龙%赵林川
黃雲豔%賈春平%劉美英%金慶輝%趙建龍%趙林川
황운염%가춘평%류미영%금경휘%조건룡%조림천
酶联免疫吸附测定%肿瘤抑制蛋白质p53%辣根过氧化物酶%金属纳米粒子%生物传感技术
酶聯免疫吸附測定%腫瘤抑製蛋白質p53%辣根過氧化物酶%金屬納米粒子%生物傳感技術
매련면역흡부측정%종류억제단백질p53%랄근과양화물매%금속납미입자%생물전감기술
目的 制备IgG-Au-HRP和IgG-Au-DNA-HRP两种纳米金标记p53抗体探针,并对其进行生物学特征表征和性质研究.方法 利用纳米金粒子与蛋白质非共价吸附和与巯基修饰的寡核苷酸以Au-S键共价结合的特点,将辣根过氧化物酶(HRP)直接或通过寡核苷酸链间接标记在纳米金表面,制备两种多功能纳米金生物探针(IgG-Au-HRP和IgG-Au-DNA-HRP探针);应用透射电镜、紫外-可见光光谱等对纳米金探针性能进行表征,对纳米金探针表面HRP酶活性进行分析,并通过酶免疫标记技术(enzyme linked immuncsorbent assay,ELISA)优化探针制备条件和比较两种探针标记效率.结果 ①两种新型探针具有良好的单分散性,大小均一,粒径约10 nm;②p53蛋白检测效果对IgG-Au-HRP和IgG-Au-DNA-HRP探针制各条件优化结果表明:制备IgG-Au-HRP探针时,HRP分子和p53抗体的最佳比例为10:1;制备IgG-Au-DNA-HRP探针时,DNA和p53抗体的最佳比例为2.5:1;③HRP分子定量检测显示:一个IgG-Au-HRP探针可标记HRP数量约11个,IgG-Au-DNA-HRP探针可标记HRP数量为20个;④两种探针结合ELISA法初步检测p53蛋白判定IgG-Au-DNA-HRP探针比IgG-Au-HRP探针检测蛋白灵敏度高.结论 两种新型纳米金探针制备简单,可作为一种新型探针应用于微量蛋白的高灵敏检测.
目的 製備IgG-Au-HRP和IgG-Au-DNA-HRP兩種納米金標記p53抗體探針,併對其進行生物學特徵錶徵和性質研究.方法 利用納米金粒子與蛋白質非共價吸附和與巰基脩飾的寡覈苷痠以Au-S鍵共價結閤的特點,將辣根過氧化物酶(HRP)直接或通過寡覈苷痠鏈間接標記在納米金錶麵,製備兩種多功能納米金生物探針(IgG-Au-HRP和IgG-Au-DNA-HRP探針);應用透射電鏡、紫外-可見光光譜等對納米金探針性能進行錶徵,對納米金探針錶麵HRP酶活性進行分析,併通過酶免疫標記技術(enzyme linked immuncsorbent assay,ELISA)優化探針製備條件和比較兩種探針標記效率.結果 ①兩種新型探針具有良好的單分散性,大小均一,粒徑約10 nm;②p53蛋白檢測效果對IgG-Au-HRP和IgG-Au-DNA-HRP探針製各條件優化結果錶明:製備IgG-Au-HRP探針時,HRP分子和p53抗體的最佳比例為10:1;製備IgG-Au-DNA-HRP探針時,DNA和p53抗體的最佳比例為2.5:1;③HRP分子定量檢測顯示:一箇IgG-Au-HRP探針可標記HRP數量約11箇,IgG-Au-DNA-HRP探針可標記HRP數量為20箇;④兩種探針結閤ELISA法初步檢測p53蛋白判定IgG-Au-DNA-HRP探針比IgG-Au-HRP探針檢測蛋白靈敏度高.結論 兩種新型納米金探針製備簡單,可作為一種新型探針應用于微量蛋白的高靈敏檢測.
목적 제비IgG-Au-HRP화IgG-Au-DNA-HRP량충납미금표기p53항체탐침,병대기진행생물학특정표정화성질연구.방법 이용납미금입자여단백질비공개흡부화여구기수식적과핵감산이Au-S건공개결합적특점,장랄근과양화물매(HRP)직접혹통과과핵감산련간접표기재납미금표면,제비량충다공능납미금생물탐침(IgG-Au-HRP화IgG-Au-DNA-HRP탐침);응용투사전경、자외-가견광광보등대납미금탐침성능진행표정,대납미금탐침표면HRP매활성진행분석,병통과매면역표기기술(enzyme linked immuncsorbent assay,ELISA)우화탐침제비조건화비교량충탐침표기효솔.결과 ①량충신형탐침구유량호적단분산성,대소균일,립경약10 nm;②p53단백검측효과대IgG-Au-HRP화IgG-Au-DNA-HRP탐침제각조건우화결과표명:제비IgG-Au-HRP탐침시,HRP분자화p53항체적최가비례위10:1;제비IgG-Au-DNA-HRP탐침시,DNA화p53항체적최가비례위2.5:1;③HRP분자정량검측현시:일개IgG-Au-HRP탐침가표기HRP수량약11개,IgG-Au-DNA-HRP탐침가표기HRP수량위20개;④량충탐침결합ELISA법초보검측p53단백판정IgG-Au-DNA-HRP탐침비IgG-Au-HRP탐침검측단백령민도고.결론 량충신형납미금탐침제비간단,가작위일충신형탐침응용우미량단백적고령민검측.
