畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2010年
7期
909-914
,共6页
史平玲%邬成业%乔松林%张改平%王爱萍%肖治军%祁艳华%卜丹
史平玲%鄔成業%喬鬆林%張改平%王愛萍%肖治軍%祁豔華%蔔丹
사평령%오성업%교송림%장개평%왕애평%초치군%기염화%복단
猪FcγRⅠ受体%共转染%Marc-145细胞
豬FcγRⅠ受體%共轉染%Marc-145細胞
저FcγRⅠ수체%공전염%Marc-145세포
本研究旨在建立稳定表达猪 FcγR Ⅰ的Mare-145 细胞系.从猪肺泡巨噬细胞中提取总 RNA,应用 RT-PCR 技术获得猪 FcγR Ⅰ和γ链 cDNA,并分别构建 PIREShyg3-γ和 pcDNA3.1-FcγR Ⅰ真核表达质粒;用脂质体共转染 Marc-145 细胞,经潮霉素B(300 μg·mL-1)和G418(400 μg·mL-1)共筛选获得稳定表达猪 FcγR Ⅰ的细胞系;运用 RT-PCR、玫瑰花环和流式细胞术对细胞系进行鉴定.结果表明成功构建了猪 FcγR Ⅰ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪 FcγR Ⅰ的细胞系,且表达于转染细胞表面的 poFcγR Ⅰ受体分子能与猪 IgG 特异结合.本研究为进一步研究奠定了基础.
本研究旨在建立穩定錶達豬 FcγR Ⅰ的Mare-145 細胞繫.從豬肺泡巨噬細胞中提取總 RNA,應用 RT-PCR 技術穫得豬 FcγR Ⅰ和γ鏈 cDNA,併分彆構建 PIREShyg3-γ和 pcDNA3.1-FcγR Ⅰ真覈錶達質粒;用脂質體共轉染 Marc-145 細胞,經潮黴素B(300 μg·mL-1)和G418(400 μg·mL-1)共篩選穫得穩定錶達豬 FcγR Ⅰ的細胞繫;運用 RT-PCR、玫瑰花環和流式細胞術對細胞繫進行鑒定.結果錶明成功構建瞭豬 FcγR Ⅰ和γ鏈真覈錶達載體,建立瞭穩定錶達豬 FcγR Ⅰ的細胞繫,且錶達于轉染細胞錶麵的 poFcγR Ⅰ受體分子能與豬 IgG 特異結閤.本研究為進一步研究奠定瞭基礎.
본연구지재건립은정표체저 FcγR Ⅰ적Mare-145 세포계.종저폐포거서세포중제취총 RNA,응용 RT-PCR 기술획득저 FcγR Ⅰ화γ련 cDNA,병분별구건 PIREShyg3-γ화 pcDNA3.1-FcγR Ⅰ진핵표체질립;용지질체공전염 Marc-145 세포,경조매소B(300 μg·mL-1)화G418(400 μg·mL-1)공사선획득은정표체저 FcγR Ⅰ적세포계;운용 RT-PCR、매괴화배화류식세포술대세포계진행감정.결과표명성공구건료저 FcγR Ⅰ화γ련진핵표체재체,건립료은정표체저 FcγR Ⅰ적세포계,차표체우전염세포표면적 poFcγR Ⅰ수체분자능여저 IgG 특이결합.본연구위진일보연구전정료기출.
