东北农业大学学报
東北農業大學學報
동북농업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST AGRICULTURAL UNIVERSITY
2010年
8期
54-59
,共6页
马德星%潘龙%郎跃深%杨静红%李广兴
馬德星%潘龍%郎躍深%楊靜紅%李廣興
마덕성%반룡%랑약심%양정홍%리엄흥
3-1E/mChIL-15%融合基因%真核表达质粒%瞬时表达
3-1E/mChIL-15%融閤基因%真覈錶達質粒%瞬時錶達
3-1E/mChIL-15%융합기인%진핵표체질립%순시표체
将鸡堆形艾美尔球虫(E. acervulina)子孢子和裂殖子表面抗原3-1E基因片段与鸡白细胞介素15成熟蛋白基因片段(mChIL15)通过四个柔性氨基酸SPGS连接,构建并鉴定真核表达质粒pcDNA3.1/3-1E-linker-mChIL-15.表达质粒纯化后应用磷酸钙法体外转染293T细胞,通过间接免疫荧光和免疫组织化学方法对重组质粒的体外瞬时表达进行检测.结果表明,成功构建了融合基因3-1E-linker-mChIL-15,转染后30 h可检测到融合基因编码的融合蛋白在293T细胞中的瞬时表达.研究为鸡艾美尔球虫基因工程疫苗进一步研制及应用奠定了基础.
將鷄堆形艾美爾毬蟲(E. acervulina)子孢子和裂殖子錶麵抗原3-1E基因片段與鷄白細胞介素15成熟蛋白基因片段(mChIL15)通過四箇柔性氨基痠SPGS連接,構建併鑒定真覈錶達質粒pcDNA3.1/3-1E-linker-mChIL-15.錶達質粒純化後應用燐痠鈣法體外轉染293T細胞,通過間接免疫熒光和免疫組織化學方法對重組質粒的體外瞬時錶達進行檢測.結果錶明,成功構建瞭融閤基因3-1E-linker-mChIL-15,轉染後30 h可檢測到融閤基因編碼的融閤蛋白在293T細胞中的瞬時錶達.研究為鷄艾美爾毬蟲基因工程疫苗進一步研製及應用奠定瞭基礎.
장계퇴형애미이구충(E. acervulina)자포자화렬식자표면항원3-1E기인편단여계백세포개소15성숙단백기인편단(mChIL15)통과사개유성안기산SPGS련접,구건병감정진핵표체질립pcDNA3.1/3-1E-linker-mChIL-15.표체질립순화후응용린산개법체외전염293T세포,통과간접면역형광화면역조직화학방법대중조질립적체외순시표체진행검측.결과표명,성공구건료융합기인3-1E-linker-mChIL-15,전염후30 h가검측도융합기인편마적융합단백재293T세포중적순시표체.연구위계애미이구충기인공정역묘진일보연제급응용전정료기출.
