中国食品学报
中國食品學報
중국식품학보
JOURNAL OF CHINESE INSTITUTE OF FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
2011年
4期
7-13
,共7页
廖永红%任文雅%孙宝国%徐瑾%沈晗
廖永紅%任文雅%孫寶國%徐瑾%瀋晗
료영홍%임문아%손보국%서근%침함
细菌%DNA提取%ERIC-PCR%优化
細菌%DNA提取%ERIC-PCR%優化
세균%DNA제취%ERIC-PCR%우화
以蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)为试验材料,比较细菌基因组DNA的提取方法.将ERIC-PCR应用于醋液分离菌的研究,对此反应体系的主要因素进行优化,最终建立了适合于此菌种的ERIC-PCR体系.采用改良的传统细菌基因组DNA提取方法,所提取的DNA质量较高,能够满足ERIC-PCR反应的需要.反应体系:25μL反应体积10×扩增缓冲液(含Mg2+)2.5 μL,20 pmol/μL ERIC-PCR引物E1 1μL,20 pmol/μL ERIC-PCR引物E2 1μL,DNA模板2μL,2.5 mmol/LdNTPs混合液2.0 μL,taq聚合酶1.1 μL,双蒸水补齐；PCR反应程序为:94℃变性3min,1个循环；94℃变性30 s,55℃退火40 s,72℃延伸1min,30个循环；72℃延伸4min.
以蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)為試驗材料,比較細菌基因組DNA的提取方法.將ERIC-PCR應用于醋液分離菌的研究,對此反應體繫的主要因素進行優化,最終建立瞭適閤于此菌種的ERIC-PCR體繫.採用改良的傳統細菌基因組DNA提取方法,所提取的DNA質量較高,能夠滿足ERIC-PCR反應的需要.反應體繫:25μL反應體積10×擴增緩遲液(含Mg2+)2.5 μL,20 pmol/μL ERIC-PCR引物E1 1μL,20 pmol/μL ERIC-PCR引物E2 1μL,DNA模闆2μL,2.5 mmol/LdNTPs混閤液2.0 μL,taq聚閤酶1.1 μL,雙蒸水補齊；PCR反應程序為:94℃變性3min,1箇循環；94℃變性30 s,55℃退火40 s,72℃延伸1min,30箇循環；72℃延伸4min.
이사상아포간균(Bacillus cereus)위시험재료,비교세균기인조DNA적제취방법.장ERIC-PCR응용우작액분리균적연구,대차반응체계적주요인소진행우화,최종건립료괄합우차균충적ERIC-PCR체계.채용개량적전통세균기인조DNA제취방법,소제취적DNA질량교고,능구만족ERIC-PCR반응적수요.반응체계:25μL반응체적10×확증완충액(함Mg2+)2.5 μL,20 pmol/μL ERIC-PCR인물E1 1μL,20 pmol/μL ERIC-PCR인물E2 1μL,DNA모판2μL,2.5 mmol/LdNTPs혼합액2.0 μL,taq취합매1.1 μL,쌍증수보제；PCR반응정서위:94℃변성3min,1개순배；94℃변성30 s,55℃퇴화40 s,72℃연신1min,30개순배；72℃연신4min.
