宁夏医科大学学报
寧夏醫科大學學報
저하의과대학학보
JOURNAL OF NINGXIA MEDICAL COLLEGE
2011年
9期
808-810
,共3页
赵婧%徐广贤%贾伟%吴若芬%师志云%魏军
趙婧%徐廣賢%賈偉%吳若芬%師誌雲%魏軍
조청%서엄현%가위%오약분%사지운%위군
TLR4%基因表达%载体构建%红色荧光蛋白
TLR4%基因錶達%載體構建%紅色熒光蛋白
TLR4%기인표체%재체구건%홍색형광단백
目的 构建在哺乳动物细胞中表达的含Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)基因的红色荧光蛋白融合表达载体(pDsRed1-N1/TLR4),并观察在细胞内的表达情况.方法 应用PCR扩增鼠TLR4全基因,将其克隆至红色荧光蛋白载体pDsRed1-N1中,重组质粒经PCR、酶切以及序列分析正确无误后,转染到Hela细胞中,并利用Western blotting鉴定TLR4蛋白在细胞中的表达.结果 重组pDsRed1-N1/TLR4融合蛋白在Hela细胞中持续高表达,经连续观察发现48h红色荧光表达量最高.结论 成功构建带有红色荧光蛋白的TLR4基因表达载体,为研究TLR4在细胞内的相关生物学功能及与mircoRNA之间的关系提供了方便有力的工具.
目的 構建在哺乳動物細胞中錶達的含Toll樣受體4(Toll like receptor 4,TLR4)基因的紅色熒光蛋白融閤錶達載體(pDsRed1-N1/TLR4),併觀察在細胞內的錶達情況.方法 應用PCR擴增鼠TLR4全基因,將其剋隆至紅色熒光蛋白載體pDsRed1-N1中,重組質粒經PCR、酶切以及序列分析正確無誤後,轉染到Hela細胞中,併利用Western blotting鑒定TLR4蛋白在細胞中的錶達.結果 重組pDsRed1-N1/TLR4融閤蛋白在Hela細胞中持續高錶達,經連續觀察髮現48h紅色熒光錶達量最高.結論 成功構建帶有紅色熒光蛋白的TLR4基因錶達載體,為研究TLR4在細胞內的相關生物學功能及與mircoRNA之間的關繫提供瞭方便有力的工具.
목적 구건재포유동물세포중표체적함Toll양수체4(Toll like receptor 4,TLR4)기인적홍색형광단백융합표체재체(pDsRed1-N1/TLR4),병관찰재세포내적표체정황.방법 응용PCR확증서TLR4전기인,장기극륭지홍색형광단백재체pDsRed1-N1중,중조질립경PCR、매절이급서렬분석정학무오후,전염도Hela세포중,병이용Western blotting감정TLR4단백재세포중적표체.결과 중조pDsRed1-N1/TLR4융합단백재Hela세포중지속고표체,경련속관찰발현48h홍색형광표체량최고.결론 성공구건대유홍색형광단백적TLR4기인표체재체,위연구TLR4재세포내적상관생물학공능급여mircoRNA지간적관계제공료방편유력적공구.
