中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2007年
10期
664-669
,共6页
司新敏%黄磊%罗和生%Shelley Chireyath Paul%吕鹏
司新敏%黃磊%囉和生%Shelley Chireyath Paul%呂鵬
사신민%황뢰%라화생%Shelley Chireyath Paul%려붕
缩胆囊素%肌醇1,4,5-三磷酸%膜片钳术%胃肌条
縮膽囊素%肌醇1,4,5-三燐痠%膜片鉗術%胃肌條
축담낭소%기순1,4,5-삼린산%막편겸술%위기조
目的 研究八肽胆囊收缩素(CCK-8)对大鼠胃窦平滑肌细胞(SMC)胞内钙释放和胞外钙内流的作用及对其具体相关机制的探讨.方法 (1)多导生理记录仪记录大鼠离体胃窦肌条在不同条件下的收缩活动;(2)免疫印迹法和免疫沉淀法检测胃窦SMC的三型1,4,5-三磷酸肌醇受体(Ins P3R3)及其磷酸化水平;(3)Fura-2/AM标记胃窦SMC,观察CCK-8S对胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响;(4)全细胞膜片钳检测胃窦SMC的L-型电压门控钙通道电流(ICa-L)的变化情况.结果 (1)CCK-8S作用下胃窦肌条收缩幅值和频率改变明显[增长率分别为(62±13)%和(58±17)%,均P＜0.01],可被CCK-A受体拮抗剂和钙泵抑制剂所阻断;(2)蛋白激酶C(PKC)上调InsP3R3磷酸化水平,抑制CCK-8S介导的内钙释放;(3)CCK-8S引起的[Ca2+]i显著升高[从(69±7)mol/L升至(472±36)nmol/L,P＜0.01]分别可被CCK-A受体或胞内钙泵抑制剂和PKC激动剂所阻断;去除外钙或给予L-型钙通道阻滞剂时CCK-8S仍可引起[Ca2+]i升高;(4)CCK-8S显著增强胃窦SMC的ICa-L[从(-56±7)pA升至(-89±6)pA,P＜0.01],可分别被ICa-L阻滞剂、胞内钙泵抑制剂和钙依赖性氯通道阻滞剂所阻断.结论 CCK-8S引起的大鼠胃窦SMC的[Ca2+]i升高依赖于PKC介导的InsP3R3磷酸化作用调节下的细胞内钙离子释放.胞内钙释放可激活ICl-Ca,引起细胞膜去极化而活化Ica-L引起胞外钙内流,最终引起SMC收缩效应.
目的 研究八肽膽囊收縮素(CCK-8)對大鼠胃竇平滑肌細胞(SMC)胞內鈣釋放和胞外鈣內流的作用及對其具體相關機製的探討.方法 (1)多導生理記錄儀記錄大鼠離體胃竇肌條在不同條件下的收縮活動;(2)免疫印跡法和免疫沉澱法檢測胃竇SMC的三型1,4,5-三燐痠肌醇受體(Ins P3R3)及其燐痠化水平;(3)Fura-2/AM標記胃竇SMC,觀察CCK-8S對胞內鈣離子濃度([Ca2+]i)的影響;(4)全細胞膜片鉗檢測胃竇SMC的L-型電壓門控鈣通道電流(ICa-L)的變化情況.結果 (1)CCK-8S作用下胃竇肌條收縮幅值和頻率改變明顯[增長率分彆為(62±13)%和(58±17)%,均P＜0.01],可被CCK-A受體拮抗劑和鈣泵抑製劑所阻斷;(2)蛋白激酶C(PKC)上調InsP3R3燐痠化水平,抑製CCK-8S介導的內鈣釋放;(3)CCK-8S引起的[Ca2+]i顯著升高[從(69±7)mol/L升至(472±36)nmol/L,P＜0.01]分彆可被CCK-A受體或胞內鈣泵抑製劑和PKC激動劑所阻斷;去除外鈣或給予L-型鈣通道阻滯劑時CCK-8S仍可引起[Ca2+]i升高;(4)CCK-8S顯著增彊胃竇SMC的ICa-L[從(-56±7)pA升至(-89±6)pA,P＜0.01],可分彆被ICa-L阻滯劑、胞內鈣泵抑製劑和鈣依賴性氯通道阻滯劑所阻斷.結論 CCK-8S引起的大鼠胃竇SMC的[Ca2+]i升高依賴于PKC介導的InsP3R3燐痠化作用調節下的細胞內鈣離子釋放.胞內鈣釋放可激活ICl-Ca,引起細胞膜去極化而活化Ica-L引起胞外鈣內流,最終引起SMC收縮效應.
목적 연구팔태담낭수축소(CCK-8)대대서위두평활기세포(SMC)포내개석방화포외개내류적작용급대기구체상관궤제적탐토.방법 (1)다도생리기록의기록대서리체위두기조재불동조건하적수축활동;(2)면역인적법화면역침정법검측위두SMC적삼형1,4,5-삼린산기순수체(Ins P3R3)급기린산화수평;(3)Fura-2/AM표기위두SMC,관찰CCK-8S대포내개리자농도([Ca2+]i)적영향;(4)전세포막편겸검측위두SMC적L-형전압문공개통도전류(ICa-L)적변화정황.결과 (1)CCK-8S작용하위두기조수축폭치화빈솔개변명현[증장솔분별위(62±13)%화(58±17)%,균P＜0.01],가피CCK-A수체길항제화개빙억제제소조단;(2)단백격매C(PKC)상조InsP3R3린산화수평,억제CCK-8S개도적내개석방;(3)CCK-8S인기적[Ca2+]i현저승고[종(69±7)mol/L승지(472±36)nmol/L,P＜0.01]분별가피CCK-A수체혹포내개빙억제제화PKC격동제소조단;거제외개혹급여L-형개통도조체제시CCK-8S잉가인기[Ca2+]i승고;(4)CCK-8S현저증강위두SMC적ICa-L[종(-56±7)pA승지(-89±6)pA,P＜0.01],가분별피ICa-L조체제、포내개빙억제제화개의뢰성록통도조체제소조단.결론 CCK-8S인기적대서위두SMC적[Ca2+]i승고의뢰우PKC개도적InsP3R3린산화작용조절하적세포내개리자석방.포내개석방가격활ICl-Ca,인기세포막거겁화이활화Ica-L인기포외개내류,최종인기SMC수축효응.
