中国兽医科技
中國獸醫科技
중국수의과기
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE AND TECHNOLOGY
2001年
11期
9-11
,共3页
付宝权%刘明远%王锋%吴秀萍%卢强%黎诚耀%窦兰清%P.Boireau
付寶權%劉明遠%王鋒%吳秀萍%盧彊%黎誠耀%竇蘭清%P.Boireau
부보권%류명원%왕봉%오수평%로강%려성요%두란청%P.Boireau
旋毛虫%成虫%期特异性基因片段%克隆
鏇毛蟲%成蟲%期特異性基因片段%剋隆
선모충%성충%기특이성기인편단%극륭
利用差减抑制杂交(SSH)技术,以旋毛虫5日龄成虫的cDNA为试验方(tester),以肌幼虫+3日龄成虫的cDNA为驱动方(driver),制备5日龄成虫差减cDNA,并与pT-Adv载体相连接,转入大肠埃希氏菌TOP 10F.以试验方的差减cDNA PCR产物+未差减cDNA为试验方探针,以驱动方的差减cDNA PCR产物+未差减cDNA为驱动方探针,对5日龄成虫差减cDNA克隆进行初步筛选,对筛选到的阳性克隆进一步用southern blot进行鉴定,并对其测序,进行序列分析.结果表明,获得1个大小为464 bp的旋毛虫5日龄成虫期特异性cDNA片段,经BLAST软件分析表明,该序列是1个未见报道的旋毛虫基因序列片段,可能编码1种表皮胶原蛋白.这为旋毛虫5日龄成虫期特异性基因全长序列的钓取、分析及鉴定奠定了基础.
利用差減抑製雜交(SSH)技術,以鏇毛蟲5日齡成蟲的cDNA為試驗方(tester),以肌幼蟲+3日齡成蟲的cDNA為驅動方(driver),製備5日齡成蟲差減cDNA,併與pT-Adv載體相連接,轉入大腸埃希氏菌TOP 10F.以試驗方的差減cDNA PCR產物+未差減cDNA為試驗方探針,以驅動方的差減cDNA PCR產物+未差減cDNA為驅動方探針,對5日齡成蟲差減cDNA剋隆進行初步篩選,對篩選到的暘性剋隆進一步用southern blot進行鑒定,併對其測序,進行序列分析.結果錶明,穫得1箇大小為464 bp的鏇毛蟲5日齡成蟲期特異性cDNA片段,經BLAST軟件分析錶明,該序列是1箇未見報道的鏇毛蟲基因序列片段,可能編碼1種錶皮膠原蛋白.這為鏇毛蟲5日齡成蟲期特異性基因全長序列的釣取、分析及鑒定奠定瞭基礎.
이용차감억제잡교(SSH)기술,이선모충5일령성충적cDNA위시험방(tester),이기유충+3일령성충적cDNA위구동방(driver),제비5일령성충차감cDNA,병여pT-Adv재체상련접,전입대장애희씨균TOP 10F.이시험방적차감cDNA PCR산물+미차감cDNA위시험방탐침,이구동방적차감cDNA PCR산물+미차감cDNA위구동방탐침,대5일령성충차감cDNA극륭진행초보사선,대사선도적양성극륭진일보용southern blot진행감정,병대기측서,진행서렬분석.결과표명,획득1개대소위464 bp적선모충5일령성충기특이성cDNA편단,경BLAST연건분석표명,해서렬시1개미견보도적선모충기인서렬편단,가능편마1충표피효원단백.저위선모충5일령성충기특이성기인전장서렬적조취、분석급감정전정료기출.
