上海医学检验杂志
上海醫學檢驗雜誌
상해의학검험잡지
SHANGHAI JOURNAL OF MEDICAL LABORATORY SCIENCES
2003年
6期
347-349
,共3页
郭晏海%吕贯庭%白玉洁%赵锦荣%张菊%闫小君
郭晏海%呂貫庭%白玉潔%趙錦榮%張菊%閆小君
곽안해%려관정%백옥길%조금영%장국%염소군
荧光偏振%突变%HBV DNA
熒光偏振%突變%HBV DNA
형광편진%돌변%HBV DNA
目的建立简便的HBV DNA前C区nt1896位点突变的检测方法.方法采用终点终止法和偏振光检测技术进行点突变的检测.首先对HBV DNA前C区基因进行PCR扩增,然后用特异探针与扩增产物中待测核苷酸的下游序列杂交,使探针的3'端可以在DNA聚合酶的作用下,依据其互补链上的待测核苷酸连接上一个标有特定荧光素的ddNTP,然后检测该3'端带有荧光素探针的偏振光值,根据检测得到的荧光素种类及其偏振光的强度可以判定待测点是何种核苷酸.结果该方法可以检测出HBV基因序列中nt1896的核苷酸类型,最低可检出的突变模板量为1×101拷贝.结论该技术可以对血清中HBV DNA前C区nt1896位点突变以及其他基因突变进行检测.
目的建立簡便的HBV DNA前C區nt1896位點突變的檢測方法.方法採用終點終止法和偏振光檢測技術進行點突變的檢測.首先對HBV DNA前C區基因進行PCR擴增,然後用特異探針與擴增產物中待測覈苷痠的下遊序列雜交,使探針的3'耑可以在DNA聚閤酶的作用下,依據其互補鏈上的待測覈苷痠連接上一箇標有特定熒光素的ddNTP,然後檢測該3'耑帶有熒光素探針的偏振光值,根據檢測得到的熒光素種類及其偏振光的彊度可以判定待測點是何種覈苷痠.結果該方法可以檢測齣HBV基因序列中nt1896的覈苷痠類型,最低可檢齣的突變模闆量為1×101拷貝.結論該技術可以對血清中HBV DNA前C區nt1896位點突變以及其他基因突變進行檢測.
목적건립간편적HBV DNA전C구nt1896위점돌변적검측방법.방법채용종점종지법화편진광검측기술진행점돌변적검측.수선대HBV DNA전C구기인진행PCR확증,연후용특이탐침여확증산물중대측핵감산적하유서렬잡교,사탐침적3'단가이재DNA취합매적작용하,의거기호보련상적대측핵감산련접상일개표유특정형광소적ddNTP,연후검측해3'단대유형광소탐침적편진광치,근거검측득도적형광소충류급기편진광적강도가이판정대측점시하충핵감산.결과해방법가이검측출HBV기인서렬중nt1896적핵감산류형,최저가검출적돌변모판량위1×101고패.결론해기술가이대혈청중HBV DNA전C구nt1896위점돌변이급기타기인돌변진행검측.
