CAJ | 학술논문

背景与目的:nm23-H1基因已被证明是转移抑制基因,转染野生型nm23-H1基因可以逆转肿瘤的恶性转移表型,但是nm23-H1基因抑制或逆转肺癌转移的分子机制却知之甚少,我们在建立转nm23-H1基因的人高转移大细胞肺癌细胞株L9981-nm23-H1的基础上,进一步探讨nm23-H1基因抑制肺癌转移的分子机制.方法:应用MTT法和改良的Bovden小室法分析转基因前后细胞的体外增殖能力及体外侵袭力的变化,体内实验分析转基因前后细胞在裸鼠体内的成瘤性及肺转移能力的改变,同时应用RT-PCR和Western blot分别检测各组细胞中转移相关基因β-catenin、E-Cadherin、CD44S、CD44V6、MMP-2、TIMP-1、VEGF、基因mRNA及蛋白表达水平.结果:(1)转基因细胞株L9981-nm23-H1的体外增殖能力[(0%vs.(19.5±2.9)%]、克隆形成能力(10.3±0.7 vs.21.7±1.3)及侵袭力显著低于L9981细胞(31.0±3.0 vs.151.0±6.3)(P＜0.01);(2)nm23-H1基因在裸鼠体内的抑瘤率显著增高(82.6%vs.0%),且转染nm23-H1基因的L9981细胞裸鼠体内移植瘤肺转移显著降低(0%vs.100%)(P＜0.01);(3)nm23-H1基因能够上调β-catenin、E-Cadherin、TIMP-1基因mRNA及蛋白表达,下调VEGF、CD44V6和MMP-2基因mRNA及蛋白表达(P＜0.01);(4)nm23-H1表达上调CD44S基因mRNA表达(P＜0.01),而对其蛋白表达无影响(P＞0.05).结论nm23-H1基因对肺癌侵袭转移的抑制或逆转作用可能是通过对肺癌转移相关基因的调控实现的.
배경여목적:nm23-H1기인이피증명시전이억제기인,전염야생형nm23-H1기인가이역전종류적악성전이표형,단시nm23-H1기인억제혹역전폐암전이적분자궤제각지지심소,아문재건립전nm23-H1기인적인고전이대세포폐암세포주L9981-nm23-H1적기출상,진일보탐토nm23-H1기인억제폐암전이적분자궤제.방법:응용MTT법화개량적Bovden소실법분석전기인전후세포적체외증식능력급체외침습력적변화,체내실험분석전기인전후세포재라서체내적성류성급폐전이능력적개변,동시응용RT-PCR화Western blot분별검측각조세포중전이상관기인β-catenin、E-Cadherin、CD44S、CD44V6、MMP-2、TIMP-1、VEGF、기인mRNA급단백표체수평.결과:(1)전기인세포주L9981-nm23-H1적체외증식능력[(0%vs.(19.5±2.9)%]、극륭형성능력(10.3±0.7 vs.21.7±1.3)급침습력현저저우L9981세포(31.0±3.0 vs.151.0±6.3)(P＜0.01);(2)nm23-H1기인재라서체내적억류솔현저증고(82.6%vs.0%),차전염nm23-H1기인적L9981세포라서체내이식류폐전이현저강저(0%vs.100%)(P＜0.01);(3)nm23-H1기인능구상조β-catenin、E-Cadherin、TIMP-1기인mRNA급단백표체,하조VEGF、CD44V6화MMP-2기인mRNA급단백표체(P＜0.01);(4)nm23-H1표체상조CD44S기인mRNA표체(P＜0.01),이대기단백표체무영향(P＞0.05).결론nm23-H1기인대폐암침습전이적억제혹역전작용가능시통과대폐암전이상관기인적조공실현적.