生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2006年
4期
12-13
,共2页
夏玉凤%赵倩%于静娟%敖光明
夏玉鳳%趙倩%于靜娟%敖光明
하옥봉%조천%우정연%오광명
gfp%lacZ%融合基因%克隆载体
gfp%lacZ%融閤基因%剋隆載體
gfp%lacZ%융합기인%극륭재체
目的:将gfp基因克隆到pGEM3Z-f(+)载体.方法:将PCR扩增得到的gfp基因插入到pGEM3Z-f(+)质粒的Sma Ⅰ位点,构建重组质粒转化大肠杆菌DH5α.结果:含重组质粒的大肠杆菌在自然光下呈现黄绿色,而在涂X-gal的培养基上它不仅发出黄绿色荧光,而且还出现蓝色.结论:gfp基因的插入没有引起载体上lacZ基因的失活,而且形成的gfp-lacZ融合基因在大肠杆菌得到了表达.表达产物不仅具有GFP活性,而且保持了β-半乳糖苷酶的生物学活性.
目的:將gfp基因剋隆到pGEM3Z-f(+)載體.方法:將PCR擴增得到的gfp基因插入到pGEM3Z-f(+)質粒的Sma Ⅰ位點,構建重組質粒轉化大腸桿菌DH5α.結果:含重組質粒的大腸桿菌在自然光下呈現黃綠色,而在塗X-gal的培養基上它不僅髮齣黃綠色熒光,而且還齣現藍色.結論:gfp基因的插入沒有引起載體上lacZ基因的失活,而且形成的gfp-lacZ融閤基因在大腸桿菌得到瞭錶達.錶達產物不僅具有GFP活性,而且保持瞭β-半乳糖苷酶的生物學活性.
목적:장gfp기인극륭도pGEM3Z-f(+)재체.방법:장PCR확증득도적gfp기인삽입도pGEM3Z-f(+)질립적Sma Ⅰ위점,구건중조질립전화대장간균DH5α.결과:함중조질립적대장간균재자연광하정현황록색,이재도X-gal적배양기상타불부발출황록색형광,이차환출현람색.결론:gfp기인적삽입몰유인기재체상lacZ기인적실활,이차형성적gfp-lacZ융합기인재대장간균득도료표체.표체산물불부구유GFP활성,이차보지료β-반유당감매적생물학활성.
