中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2007年
48期
9692-9695
,共4页
神经元样细胞%壳聚糖%温敏型水凝胶%三磷酸胞苷二钠
神經元樣細胞%殼聚糖%溫敏型水凝膠%三燐痠胞苷二鈉
신경원양세포%각취당%온민형수응효%삼린산포감이납
目的:为验证温敏型可注射性水凝胶壳聚糖-甘油磷酸钠(chitosan/glycerophosphate,C/GP)作为神经支架的可行性,将体外诱导的神经元样细胞与温敏型C/GP凝胶共培养,观察其生物相容性.方法:实验于2006-03/12在白求恩国际和平医院实验室完成.①实验材料:壳聚糖由浙江金壳生物化学有限公司提供,β-甘油磷酸钠由Fluka AG公司提供.②实验方法:脱乙酰度91%的壳聚糖200 mg溶于9 mL HCl溶液中,甘油磷酸钠560 mg溶于1 mL去离子水中,消毒后室温下按2∶3体积比将甘油磷酸钠溶液加入壳聚糖溶液中制备温敏型水凝胶C/GP.实验分为3组:由骨髓基质细胞诱导分化的神经元样细胞与C/GP复合物共培养者为实验组;神经元样细胞与完全培养基共培养者为细胞对照组;C/GP复合物加完全培养基共培养者为C/GP对照组.③观察指标:光镜下观察各组细胞形态变化,各组在培养24 h后MTT法酶标仪测吸光度(A值),连续观察7 d绘制生长曲线.结果:神经元样细胞在C/GP凝胶呈三维分布,胞体变大,逐渐伸出突起,呈单极、双极或多极,部分相邻细胞的突起连接.神经元样细胞的生长曲线为"S"型,第1,2天为潜伏期,第3~5 天为对数生长期,6 d后细胞数量开始减少,实验组的A值较细胞对照组略低,两组在7 d后A值均有所降低,但各个时间点差异均无显著性意义(P>0.05).结论:神经元样细胞与C/GP凝胶有良好的生物相容性,温敏型可注射性C/GP凝胶能作为神经工程的载体材料.
目的:為驗證溫敏型可註射性水凝膠殼聚糖-甘油燐痠鈉(chitosan/glycerophosphate,C/GP)作為神經支架的可行性,將體外誘導的神經元樣細胞與溫敏型C/GP凝膠共培養,觀察其生物相容性.方法:實驗于2006-03/12在白求恩國際和平醫院實驗室完成.①實驗材料:殼聚糖由浙江金殼生物化學有限公司提供,β-甘油燐痠鈉由Fluka AG公司提供.②實驗方法:脫乙酰度91%的殼聚糖200 mg溶于9 mL HCl溶液中,甘油燐痠鈉560 mg溶于1 mL去離子水中,消毒後室溫下按2∶3體積比將甘油燐痠鈉溶液加入殼聚糖溶液中製備溫敏型水凝膠C/GP.實驗分為3組:由骨髓基質細胞誘導分化的神經元樣細胞與C/GP複閤物共培養者為實驗組;神經元樣細胞與完全培養基共培養者為細胞對照組;C/GP複閤物加完全培養基共培養者為C/GP對照組.③觀察指標:光鏡下觀察各組細胞形態變化,各組在培養24 h後MTT法酶標儀測吸光度(A值),連續觀察7 d繪製生長麯線.結果:神經元樣細胞在C/GP凝膠呈三維分佈,胞體變大,逐漸伸齣突起,呈單極、雙極或多極,部分相鄰細胞的突起連接.神經元樣細胞的生長麯線為"S"型,第1,2天為潛伏期,第3~5 天為對數生長期,6 d後細胞數量開始減少,實驗組的A值較細胞對照組略低,兩組在7 d後A值均有所降低,但各箇時間點差異均無顯著性意義(P>0.05).結論:神經元樣細胞與C/GP凝膠有良好的生物相容性,溫敏型可註射性C/GP凝膠能作為神經工程的載體材料.
목적:위험증온민형가주사성수응효각취당-감유린산납(chitosan/glycerophosphate,C/GP)작위신경지가적가행성,장체외유도적신경원양세포여온민형C/GP응효공배양,관찰기생물상용성.방법:실험우2006-03/12재백구은국제화평의원실험실완성.①실험재료:각취당유절강금각생물화학유한공사제공,β-감유린산납유Fluka AG공사제공.②실험방법:탈을선도91%적각취당200 mg용우9 mL HCl용액중,감유린산납560 mg용우1 mL거리자수중,소독후실온하안2∶3체적비장감유린산납용액가입각취당용액중제비온민형수응효C/GP.실험분위3조:유골수기질세포유도분화적신경원양세포여C/GP복합물공배양자위실험조;신경원양세포여완전배양기공배양자위세포대조조;C/GP복합물가완전배양기공배양자위C/GP대조조.③관찰지표:광경하관찰각조세포형태변화,각조재배양24 h후MTT법매표의측흡광도(A치),련속관찰7 d회제생장곡선.결과:신경원양세포재C/GP응효정삼유분포,포체변대,축점신출돌기,정단겁、쌍겁혹다겁,부분상린세포적돌기련접.신경원양세포적생장곡선위"S"형,제1,2천위잠복기,제3~5 천위대수생장기,6 d후세포수량개시감소,실험조적A치교세포대조조략저,량조재7 d후A치균유소강저,단각개시간점차이균무현저성의의(P>0.05).결론:신경원양세포여C/GP응효유량호적생물상용성,온민형가주사성C/GP응효능작위신경공정적재체재료.