武汉植物学研究
武漢植物學研究
무한식물학연구
JOURNAL OF WUHAN BOTANICAL RESEARCH
2008年
1期
1-6
,共6页
杨晓华%彭晓珏%杨国华%冯玲玲%王坤%李阳生
楊曉華%彭曉玨%楊國華%馮玲玲%王坤%李暘生
양효화%팽효각%양국화%풍령령%왕곤%리양생
水稻%耐盐%OsRab7%功能分析%表达载体构建
水稻%耐鹽%OsRab7%功能分析%錶達載體構建
수도%내염%OsRab7%공능분석%표체재체구건
Rab7是一个GTP结合蛋白,隶属于Rab家族,该家族在调控膜泡的运输、结合以及细胞内膜结构的组织中行使重要作用.本实验通过RT-PCR技术从盐敏感水稻品种'日本晴'('Nipponbare')获得了OsRab7基因全长序列,成功构建了原核表达载体pET-32a-OsRab7.在IPTG诱导下,该蛋白高效表达,并明显缓解了高盐环境(4.5%~8.5% NaCl)对大肠杆菌的生长胁迫.为进一步研究该基因的功能,将OsRab7在大肠杆菌中的表达蛋白纯化, 并利用p1301B(pCAMBIA1301改造载体)构建了植物表达载体,成功转化来源于水稻株系'中花11'(盐敏感)的愈伤组织,为探讨其在水稻中的表达模式和功能分析及应用于水稻耐盐品种的改良奠定了一定的基础.
Rab7是一箇GTP結閤蛋白,隸屬于Rab傢族,該傢族在調控膜泡的運輸、結閤以及細胞內膜結構的組織中行使重要作用.本實驗通過RT-PCR技術從鹽敏感水稻品種'日本晴'('Nipponbare')穫得瞭OsRab7基因全長序列,成功構建瞭原覈錶達載體pET-32a-OsRab7.在IPTG誘導下,該蛋白高效錶達,併明顯緩解瞭高鹽環境(4.5%~8.5% NaCl)對大腸桿菌的生長脅迫.為進一步研究該基因的功能,將OsRab7在大腸桿菌中的錶達蛋白純化, 併利用p1301B(pCAMBIA1301改造載體)構建瞭植物錶達載體,成功轉化來源于水稻株繫'中花11'(鹽敏感)的愈傷組織,為探討其在水稻中的錶達模式和功能分析及應用于水稻耐鹽品種的改良奠定瞭一定的基礎.
Rab7시일개GTP결합단백,대속우Rab가족,해가족재조공막포적운수、결합이급세포내막결구적조직중행사중요작용.본실험통과RT-PCR기술종염민감수도품충'일본청'('Nipponbare')획득료OsRab7기인전장서렬,성공구건료원핵표체재체pET-32a-OsRab7.재IPTG유도하,해단백고효표체,병명현완해료고염배경(4.5%~8.5% NaCl)대대장간균적생장협박.위진일보연구해기인적공능,장OsRab7재대장간균중적표체단백순화, 병이용p1301B(pCAMBIA1301개조재체)구건료식물표체재체,성공전화래원우수도주계'중화11'(염민감)적유상조직,위탐토기재수도중적표체모식화공능분석급응용우수도내염품충적개량전정료일정적기출.