热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2008年
1期
33-37
,共5页
赵焕阁%牛胜鸟%彭存智%刘志昕
趙煥閣%牛勝鳥%彭存智%劉誌昕
조환각%우성조%팽존지%류지흔
香蕉束顶病毒%BBTV DNA2编码区%融合表达
香蕉束頂病毒%BBTV DNA2編碼區%融閤錶達
향초속정병독%BBTV DNA2편마구%융합표체
利用PCR方法克隆香蕉束顶病毒海南分离物(Banana bunchy top virus,BBTV-HN)DNA2编码区,将其插入到原核表达载体pGEX-6p-1谷胱苷肽-S-转移酶(GST)基因下游.所得克隆pGEX-HN-B2测序结果表明,插入的DNA2片段为267 bp,且表达相位和理论上设计的完全一致.把此重组质粒转化到E.coli Rosetta(DE3)中,经过异丙硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后出现约33 Ku融合蛋白质表达条带.为获得特异的血清,切下目的表达条带并免疫兔子.经Western-blotting检测,获取的血清可以和表达的33 Ku融合蛋白特异结合,表明已成功获得DNA2编码蛋白的血清.
利用PCR方法剋隆香蕉束頂病毒海南分離物(Banana bunchy top virus,BBTV-HN)DNA2編碼區,將其插入到原覈錶達載體pGEX-6p-1穀胱苷肽-S-轉移酶(GST)基因下遊.所得剋隆pGEX-HN-B2測序結果錶明,插入的DNA2片段為267 bp,且錶達相位和理論上設計的完全一緻.把此重組質粒轉化到E.coli Rosetta(DE3)中,經過異丙硫代半乳糖苷(IPTG)誘導後齣現約33 Ku融閤蛋白質錶達條帶.為穫得特異的血清,切下目的錶達條帶併免疫兔子.經Western-blotting檢測,穫取的血清可以和錶達的33 Ku融閤蛋白特異結閤,錶明已成功穫得DNA2編碼蛋白的血清.
이용PCR방법극륭향초속정병독해남분리물(Banana bunchy top virus,BBTV-HN)DNA2편마구,장기삽입도원핵표체재체pGEX-6p-1곡광감태-S-전이매(GST)기인하유.소득극륭pGEX-HN-B2측서결과표명,삽입적DNA2편단위267 bp,차표체상위화이론상설계적완전일치.파차중조질립전화도E.coli Rosetta(DE3)중,경과이병류대반유당감(IPTG)유도후출현약33 Ku융합단백질표체조대.위획득특이적혈청,절하목적표체조대병면역토자.경Western-blotting검측,획취적혈청가이화표체적33 Ku융합단백특이결합,표명이성공획득DNA2편마단백적혈청.
