东南大学学报（医学版）
東南大學學報（醫學版）
동남대학학보（의학판）
JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2009年
3期
166-170
,共5页
郭英%徐佳佳%商延芳%李楠%高峰%黄培林
郭英%徐佳佳%商延芳%李楠%高峰%黃培林
곽영%서가가%상연방%리남%고봉%황배림
Reg Ⅳ%碳水化合物识别域%结直肠癌%基因转染%基因重叠延伸拼接PCR
Reg Ⅳ%碳水化閤物識彆域%結直腸癌%基因轉染%基因重疊延伸拼接PCR
Reg Ⅳ%탄수화합물식별역%결직장암%기인전염%기인중첩연신병접PCR
目的: 探讨应用基因重叠延伸拼接PCR (SOE-PCR)技术构建Reg Ⅳ基因缺失CRD 结构域表达载体,并转染Reg Ⅳ低表达结直肠癌细胞系.方法: 应用SOE-PCR法获得Reg Ⅳ缺失CRD 结构域片段,构建真核表达载体并转染Reg Ⅳ低表达结直肠癌LoVo细胞,G418筛选,RT-PCR检测鉴定.结果: 经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体构建成功,经pcDNA3.1-Reg Ⅳ-domain△转染的LoVo细胞Reg Ⅳ-domain △呈阳性表达.结论: 利用SOE-PCR技术可成功构建Reg Ⅳ基因缺失CRD 结构域的表达载体.
目的: 探討應用基因重疊延伸拼接PCR (SOE-PCR)技術構建Reg Ⅳ基因缺失CRD 結構域錶達載體,併轉染Reg Ⅳ低錶達結直腸癌細胞繫.方法: 應用SOE-PCR法穫得Reg Ⅳ缺失CRD 結構域片段,構建真覈錶達載體併轉染Reg Ⅳ低錶達結直腸癌LoVo細胞,G418篩選,RT-PCR檢測鑒定.結果: 經酶切鑒定篩選齣的重組體測序結果與目的序列完全一緻,重組載體構建成功,經pcDNA3.1-Reg Ⅳ-domain△轉染的LoVo細胞Reg Ⅳ-domain △呈暘性錶達.結論: 利用SOE-PCR技術可成功構建Reg Ⅳ基因缺失CRD 結構域的錶達載體.
목적: 탐토응용기인중첩연신병접PCR (SOE-PCR)기술구건Reg Ⅳ기인결실CRD 결구역표체재체,병전염Reg Ⅳ저표체결직장암세포계.방법: 응용SOE-PCR법획득Reg Ⅳ결실CRD 결구역편단,구건진핵표체재체병전염Reg Ⅳ저표체결직장암LoVo세포,G418사선,RT-PCR검측감정.결과: 경매절감정사선출적중조체측서결과여목적서렬완전일치,중조재체구건성공,경pcDNA3.1-Reg Ⅳ-domain△전염적LoVo세포Reg Ⅳ-domain △정양성표체.결론: 이용SOE-PCR기술가성공구건Reg Ⅳ기인결실CRD 결구역적표체재체.
