食品与药品
食品與藥品
식품여약품
FOOD AND DRUG
2009年
4期
7-11
,共5页
赵健%肖伟%范立强%王富军%吕稼锋%袁勤生%刘建文
趙健%肖偉%範立彊%王富軍%呂稼鋒%袁勤生%劉建文
조건%초위%범립강%왕부군%려가봉%원근생%류건문
EC-SOD3-凋亡蛋白%克隆表达%纯化%噻唑蓝法
EC-SOD3-凋亡蛋白%剋隆錶達%純化%噻唑藍法
EC-SOD3-조망단백%극륭표체%순화%새서람법
目的 克隆表达EC-SOD3-凋亡素融合蛋白,并检测其生物活性.方法 PCR扩增出apoptin序列,与表达载体EC-SOD3-pET-28a连接后在大肠杆菌B121(DE3)中经IPTG诱导,表达产物进行Ni2+-NTA纯化和MTT活性检测.结果 表达载体pET-28a-EC-SOD3-apoptin经酶切鉴定和序列分析,证明质粒构建正确,转化E.coli BL21(DE3)后,重组蛋白获得表达,Ni2+-NTA纯化后的凋亡素融合蛋白纯度达到85%以上,经噻唑蓝(MTT)法测定具有活性.结论 成功构建了表达载体pET-28a-EC-SOD3-apoptin,并在大肠杆菌中表达了EC-SOD3-凋亡素融合蛋白,纯化的蛋白质具有诱导HeLa细胞凋亡的能力.
目的 剋隆錶達EC-SOD3-凋亡素融閤蛋白,併檢測其生物活性.方法 PCR擴增齣apoptin序列,與錶達載體EC-SOD3-pET-28a連接後在大腸桿菌B121(DE3)中經IPTG誘導,錶達產物進行Ni2+-NTA純化和MTT活性檢測.結果 錶達載體pET-28a-EC-SOD3-apoptin經酶切鑒定和序列分析,證明質粒構建正確,轉化E.coli BL21(DE3)後,重組蛋白穫得錶達,Ni2+-NTA純化後的凋亡素融閤蛋白純度達到85%以上,經噻唑藍(MTT)法測定具有活性.結論 成功構建瞭錶達載體pET-28a-EC-SOD3-apoptin,併在大腸桿菌中錶達瞭EC-SOD3-凋亡素融閤蛋白,純化的蛋白質具有誘導HeLa細胞凋亡的能力.
목적 극륭표체EC-SOD3-조망소융합단백,병검측기생물활성.방법 PCR확증출apoptin서렬,여표체재체EC-SOD3-pET-28a련접후재대장간균B121(DE3)중경IPTG유도,표체산물진행Ni2+-NTA순화화MTT활성검측.결과 표체재체pET-28a-EC-SOD3-apoptin경매절감정화서렬분석,증명질립구건정학,전화E.coli BL21(DE3)후,중조단백획득표체,Ni2+-NTA순화후적조망소융합단백순도체도85%이상,경새서람(MTT)법측정구유활성.결론 성공구건료표체재체pET-28a-EC-SOD3-apoptin,병재대장간균중표체료EC-SOD3-조망소융합단백,순화적단백질구유유도HeLa세포조망적능력.
