生物医学工程与临床
生物醫學工程與臨床
생물의학공정여림상
BIOMEDICAL ENGINEERING AND CLINICAL MEDICINE
2010年
1期
15-19,封2
,共6页
朴正福%丁淑芹%张海燕%小林护%加茂功%樱川宣男%李宁
樸正福%丁淑芹%張海燕%小林護%加茂功%櫻川宣男%李寧
박정복%정숙근%장해연%소림호%가무공%앵천선남%리저
羊膜%羊膜间充质干细胞%生物学特性%再生医学
羊膜%羊膜間充質榦細胞%生物學特性%再生醫學
양막%양막간충질간세포%생물학특성%재생의학
目的 建立人羊膜间充质干细胞(hAMC)的分离培养方法及探讨其在再生医学中的潜在应用性.方法 取38～40周孕妇剖宫产术后人羊膜,用多种酶消化法制备hAMC悬浮液.并用免疫细胞化学方法探讨其多分化潜能如hAMC的神经及肝脏发生相关蛋白的表达;荧光激活细胞仪分离法(FACS)检测主要组织相容性复合体(MHC)家族分子,同时探讨其致瘤性.结果 从人羊膜中分离出高纯度hAMC,并摸索出其最适合的培养条件;细胞成细长梭形或星形,胞质丰富,细胞核呈圆形,1～3个核仁,易贴壁,生长繁殖快,在体外可连续培养20代以上.免疫细胞化学结果显示;神经发生相关蛋白(Musashi-1、Nestin、Vimentin)阳性及肝脏发生相关蛋白[Fh-1、Integrin B1、HNF(3β、4α、1α)、C/EBPα、Albumin、AAT]等阳性;人MHC Class Ⅱ阴性,人MHC Class Ⅰ弱阳性;癌化实验显示hAMC无致瘤性.结论人羊膜中分离提纯的hAMC中至少包含向神经及肝脏细胞分化的干细胞样的细胞群,具有低免疫原性、无致瘤性等特点.这些结果支持hAMC作为新的、安全的细胞来源可用于再生医学研究.
目的 建立人羊膜間充質榦細胞(hAMC)的分離培養方法及探討其在再生醫學中的潛在應用性.方法 取38～40週孕婦剖宮產術後人羊膜,用多種酶消化法製備hAMC懸浮液.併用免疫細胞化學方法探討其多分化潛能如hAMC的神經及肝髒髮生相關蛋白的錶達;熒光激活細胞儀分離法(FACS)檢測主要組織相容性複閤體(MHC)傢族分子,同時探討其緻瘤性.結果 從人羊膜中分離齣高純度hAMC,併摸索齣其最適閤的培養條件;細胞成細長梭形或星形,胞質豐富,細胞覈呈圓形,1～3箇覈仁,易貼壁,生長繁殖快,在體外可連續培養20代以上.免疫細胞化學結果顯示;神經髮生相關蛋白(Musashi-1、Nestin、Vimentin)暘性及肝髒髮生相關蛋白[Fh-1、Integrin B1、HNF(3β、4α、1α)、C/EBPα、Albumin、AAT]等暘性;人MHC Class Ⅱ陰性,人MHC Class Ⅰ弱暘性;癌化實驗顯示hAMC無緻瘤性.結論人羊膜中分離提純的hAMC中至少包含嚮神經及肝髒細胞分化的榦細胞樣的細胞群,具有低免疫原性、無緻瘤性等特點.這些結果支持hAMC作為新的、安全的細胞來源可用于再生醫學研究.
목적 건립인양막간충질간세포(hAMC)적분리배양방법급탐토기재재생의학중적잠재응용성.방법 취38～40주잉부부궁산술후인양막,용다충매소화법제비hAMC현부액.병용면역세포화학방법탐토기다분화잠능여hAMC적신경급간장발생상관단백적표체;형광격활세포의분리법(FACS)검측주요조직상용성복합체(MHC)가족분자,동시탐토기치류성.결과 종인양막중분리출고순도hAMC,병모색출기최괄합적배양조건;세포성세장사형혹성형,포질봉부,세포핵정원형,1～3개핵인,역첩벽,생장번식쾌,재체외가련속배양20대이상.면역세포화학결과현시;신경발생상관단백(Musashi-1、Nestin、Vimentin)양성급간장발생상관단백[Fh-1、Integrin B1、HNF(3β、4α、1α)、C/EBPα、Albumin、AAT]등양성;인MHC Class Ⅱ음성,인MHC Class Ⅰ약양성;암화실험현시hAMC무치류성.결론인양막중분리제순적hAMC중지소포함향신경급간장세포분화적간세포양적세포군,구유저면역원성、무치류성등특점.저사결과지지hAMC작위신적、안전적세포래원가용우재생의학연구.
