安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
2010年
4期
487-490
,共4页
张凤英%余科科%李菲菲%霍寅萍%郑红%瞿成奎%汪思应
張鳳英%餘科科%李菲菲%霍寅萍%鄭紅%瞿成奎%汪思應
장봉영%여과과%리비비%곽인평%정홍%구성규%왕사응
蛋白质酪氨酸磷酸酶类,非受体%细胞迁移分析,白细胞%NF-κB
蛋白質酪氨痠燐痠酶類,非受體%細胞遷移分析,白細胞%NF-κB
단백질락안산린산매류,비수체%세포천이분석,백세포%NF-κB
目的 采用已经建立的SHP-2 D61G基因敲入小鼠为研究对象,观察SHP-2激活突变是否对白细胞的黏附、侵袭及细胞因子分泌产生影响,并探讨可能的分子机制.方法 常规分离小鼠白细胞,Fibronectin黏附实验检测细胞黏附能力并用结晶紫染色定量,Transwell小室分析细胞迁移,半定量RT-PCR分析白细胞介素-2(IL-2)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达,ELISA法检测细胞培养上清中IL-2及TNF-α浓度,凝胶阻滞实验分析白细胞内NF-κB核内转移情况.结果 SHP-2 D61G/+激活突变的小鼠白细胞黏附、迁移能力较对照小鼠的白细胞明显增强;突变小鼠白细胞IL-2及TNF-α mRNA表达丰度明显增高,其培养上清中IL-2、TNF-α浓度也相应升高;突变小鼠白细胞NF-κB核内转移明显增多.结论 SHP-2激活突变后可能通过增强的NF-κB信号途径,促进白细胞黏附并侵袭;同时增强其分泌炎症因子的能力,可能介导多器官损伤.
目的 採用已經建立的SHP-2 D61G基因敲入小鼠為研究對象,觀察SHP-2激活突變是否對白細胞的黏附、侵襲及細胞因子分泌產生影響,併探討可能的分子機製.方法 常規分離小鼠白細胞,Fibronectin黏附實驗檢測細胞黏附能力併用結晶紫染色定量,Transwell小室分析細胞遷移,半定量RT-PCR分析白細胞介素-2(IL-2)及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)mRNA錶達,ELISA法檢測細胞培養上清中IL-2及TNF-α濃度,凝膠阻滯實驗分析白細胞內NF-κB覈內轉移情況.結果 SHP-2 D61G/+激活突變的小鼠白細胞黏附、遷移能力較對照小鼠的白細胞明顯增彊;突變小鼠白細胞IL-2及TNF-α mRNA錶達豐度明顯增高,其培養上清中IL-2、TNF-α濃度也相應升高;突變小鼠白細胞NF-κB覈內轉移明顯增多.結論 SHP-2激活突變後可能通過增彊的NF-κB信號途徑,促進白細胞黏附併侵襲;同時增彊其分泌炎癥因子的能力,可能介導多器官損傷.
목적 채용이경건립적SHP-2 D61G기인고입소서위연구대상,관찰SHP-2격활돌변시부대백세포적점부、침습급세포인자분비산생영향,병탐토가능적분자궤제.방법 상규분리소서백세포,Fibronectin점부실험검측세포점부능력병용결정자염색정량,Transwell소실분석세포천이,반정량RT-PCR분석백세포개소-2(IL-2)급종류배사인자-α(TNF-α)mRNA표체,ELISA법검측세포배양상청중IL-2급TNF-α농도,응효조체실험분석백세포내NF-κB핵내전이정황.결과 SHP-2 D61G/+격활돌변적소서백세포점부、천이능력교대조소서적백세포명현증강;돌변소서백세포IL-2급TNF-α mRNA표체봉도명현증고,기배양상청중IL-2、TNF-α농도야상응승고;돌변소서백세포NF-κB핵내전이명현증다.결론 SHP-2격활돌변후가능통과증강적NF-κB신호도경,촉진백세포점부병침습;동시증강기분비염증인자적능력,가능개도다기관손상.
