暨南大学学报（自然科学与医学版）
暨南大學學報（自然科學與醫學版）
기남대학학보（자연과학여의학판）
JOURNAL OF JINAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE & MEDICINE EDITION）
2010年
4期
357-363
,共7页
师玲玲%王立生%刘赴平%王德文%宇丽%余卫%幺俊卿%许惠芯%余霖%陈少彬
師玲玲%王立生%劉赴平%王德文%宇麗%餘衛%幺俊卿%許惠芯%餘霖%陳少彬
사령령%왕립생%류부평%왕덕문%우려%여위%요준경%허혜심%여림%진소빈
人脐血间充质干细胞%绿色荧光蛋白%细胞移植%肝损伤%示踪
人臍血間充質榦細胞%綠色熒光蛋白%細胞移植%肝損傷%示蹤
인제혈간충질간세포%록색형광단백%세포이식%간손상%시종
目的:建立慢病毒载体转染增强型绿色荧光蛋白基因至人脐血间充质干细胞的实验体系,观察绿色荧光蛋白标记的人脐血间充质干细胞在急性肝坏死大鼠模型肝脏局部的迁徙途径.方法:采集新鲜人脐血,梯度离心及低血清培养基体外分离、培养人脐血间充质干细胞,以慢病毒为载体转染绿色荧光蛋白基因至人脐血间充质干细胞.CCl4橄榄油溶液腹腔注射建立急性肝坏死大鼠模型,将2.0～5.0×106绿色荧光蛋白标记的人脐血间充质干细胞肝脏局部移植给模型鼠,24、48、72 h、1周、2周和4周分别处死模型鼠,冰冻切片,荧光显微镜下观察移植细胞在肝脏局部的迁徙途径.结果:转染细胞荧光显微镜下呈现均一绿色荧光影像.细胞移植24 h内可见荧光信号由进针孔迁徙至汇管区,移植治疗48 h时移植细胞定居于汇管区,48 h后荧光信号向坏死病灶区域迁徙,1周后在肝脏坏死局部区域可见稳定的荧光信号.结论:本实验构建的绿色荧光蛋白转染人脐血间充质干细胞示踪体系稳定表达绿色荧光蛋白.经动物实验证明人脐血间充质干细胞肝脏局部移植给肝坏死大鼠模型后在肝脏局部经历了"进针孔至汇管区","汇管区至病灶区"的二次迁徙模式.
目的:建立慢病毒載體轉染增彊型綠色熒光蛋白基因至人臍血間充質榦細胞的實驗體繫,觀察綠色熒光蛋白標記的人臍血間充質榦細胞在急性肝壞死大鼠模型肝髒跼部的遷徙途徑.方法:採集新鮮人臍血,梯度離心及低血清培養基體外分離、培養人臍血間充質榦細胞,以慢病毒為載體轉染綠色熒光蛋白基因至人臍血間充質榦細胞.CCl4橄欖油溶液腹腔註射建立急性肝壞死大鼠模型,將2.0～5.0×106綠色熒光蛋白標記的人臍血間充質榦細胞肝髒跼部移植給模型鼠,24、48、72 h、1週、2週和4週分彆處死模型鼠,冰凍切片,熒光顯微鏡下觀察移植細胞在肝髒跼部的遷徙途徑.結果:轉染細胞熒光顯微鏡下呈現均一綠色熒光影像.細胞移植24 h內可見熒光信號由進針孔遷徙至彙管區,移植治療48 h時移植細胞定居于彙管區,48 h後熒光信號嚮壞死病竈區域遷徙,1週後在肝髒壞死跼部區域可見穩定的熒光信號.結論:本實驗構建的綠色熒光蛋白轉染人臍血間充質榦細胞示蹤體繫穩定錶達綠色熒光蛋白.經動物實驗證明人臍血間充質榦細胞肝髒跼部移植給肝壞死大鼠模型後在肝髒跼部經歷瞭"進針孔至彙管區","彙管區至病竈區"的二次遷徙模式.
목적:건립만병독재체전염증강형록색형광단백기인지인제혈간충질간세포적실험체계,관찰록색형광단백표기적인제혈간충질간세포재급성간배사대서모형간장국부적천사도경.방법:채집신선인제혈,제도리심급저혈청배양기체외분리、배양인제혈간충질간세포,이만병독위재체전염록색형광단백기인지인제혈간충질간세포.CCl4감람유용액복강주사건립급성간배사대서모형,장2.0～5.0×106록색형광단백표기적인제혈간충질간세포간장국부이식급모형서,24、48、72 h、1주、2주화4주분별처사모형서,빙동절편,형광현미경하관찰이식세포재간장국부적천사도경.결과:전염세포형광현미경하정현균일록색형광영상.세포이식24 h내가견형광신호유진침공천사지회관구,이식치료48 h시이식세포정거우회관구,48 h후형광신호향배사병조구역천사,1주후재간장배사국부구역가견은정적형광신호.결론:본실험구건적록색형광단백전염인제혈간충질간세포시종체계은정표체록색형광단백.경동물실험증명인제혈간충질간세포간장국부이식급간배사대서모형후재간장국부경력료"진침공지회관구","회관구지병조구"적이차천사모식.
