福建医科大学学报
福建醫科大學學報
복건의과대학학보
JOURNAL OF FUJIAN MEDICAL UNIVERSITY
2011年
5期
313-318
,共6页
吴锡阶%卢琳%陈良万%张志刚%严亮亮
吳錫階%盧琳%陳良萬%張誌剛%嚴亮亮
오석계%로림%진량만%장지강%엄량량
心脏移植%血红素加氧酶-1%移植,异种%移植物排斥%大鼠,Sprague-Dawley%疾病模型,动物%基因%转染
心髒移植%血紅素加氧酶-1%移植,異種%移植物排斥%大鼠,Sprague-Dawley%疾病模型,動物%基因%轉染
심장이식%혈홍소가양매-1%이식,이충%이식물배척%대서,Sprague-Dawley%질병모형,동물%기인%전염
目的 观察血红素加氧酶-1(HO-1)基因转染对非协调性异种心脏移植物的影响,并探讨其可能的保护机制.方法 采用颈部袖套血管吻合法联合应用中华眼镜蛇毒因子(CVF)建立稳定的豚鼠-SD大鼠非协调性异种异位心脏移植模型.供体豚鼠和受体SD大鼠各24只,每组各8只随机配对分为Ⅰ组(对照组)、Ⅱ组(空白载体组)和Ⅲ组(HO-1基因转染组),分别在供心冷缺血期间经冠状动脉缓慢灌注单纯的HTK液、含腺病毒空白载体的HTK液和含有HO-1基因的腺病毒表达载体HTK液,供心复跳后观察其存活时间;供心停跳后取心肌组织行病理学检查,RT-PCR检测目的 基因的表达情况,免疫组织化学染色进行定性和定位分析.结果 RT-PCR检测证实异种移植心脏外源性HO-1基因转录;免疫组织化学染色证实目的 基因表达蛋白在移植心脏血管周围心肌细胞以及冠状动脉微血管内表达.HO-1表达的移植心脏炎症细胞浸润明显减少,巨噬细胞和NK细胞浸润明显减少,心肌细胞凋亡减少,移植心脏平均存活时间[n=8,(40±3)h]与空白载体组[n=8,(21±2)h,P＜0.01]和对照组[n=8,(20±3)h,P＜0.01]相比明显延长.结论 在供心离体期间,经冠状动脉缓慢灌注腺病毒表达载体介导HO-1基因进行基因转染,可以使保护性功能基因HO-1在移植心脏成功转录并表达其相应的功能蛋白,从而保护异种移植物减轻免疫损害,延长异种移植心脏的存活时间,为进一步的临床应用提供实验依据.
目的 觀察血紅素加氧酶-1(HO-1)基因轉染對非協調性異種心髒移植物的影響,併探討其可能的保護機製.方法 採用頸部袖套血管吻閤法聯閤應用中華眼鏡蛇毒因子(CVF)建立穩定的豚鼠-SD大鼠非協調性異種異位心髒移植模型.供體豚鼠和受體SD大鼠各24隻,每組各8隻隨機配對分為Ⅰ組(對照組)、Ⅱ組(空白載體組)和Ⅲ組(HO-1基因轉染組),分彆在供心冷缺血期間經冠狀動脈緩慢灌註單純的HTK液、含腺病毒空白載體的HTK液和含有HO-1基因的腺病毒錶達載體HTK液,供心複跳後觀察其存活時間;供心停跳後取心肌組織行病理學檢查,RT-PCR檢測目的 基因的錶達情況,免疫組織化學染色進行定性和定位分析.結果 RT-PCR檢測證實異種移植心髒外源性HO-1基因轉錄;免疫組織化學染色證實目的 基因錶達蛋白在移植心髒血管週圍心肌細胞以及冠狀動脈微血管內錶達.HO-1錶達的移植心髒炎癥細胞浸潤明顯減少,巨噬細胞和NK細胞浸潤明顯減少,心肌細胞凋亡減少,移植心髒平均存活時間[n=8,(40±3)h]與空白載體組[n=8,(21±2)h,P＜0.01]和對照組[n=8,(20±3)h,P＜0.01]相比明顯延長.結論 在供心離體期間,經冠狀動脈緩慢灌註腺病毒錶達載體介導HO-1基因進行基因轉染,可以使保護性功能基因HO-1在移植心髒成功轉錄併錶達其相應的功能蛋白,從而保護異種移植物減輕免疫損害,延長異種移植心髒的存活時間,為進一步的臨床應用提供實驗依據.
목적 관찰혈홍소가양매-1(HO-1)기인전염대비협조성이충심장이식물적영향,병탐토기가능적보호궤제.방법 채용경부수투혈관문합법연합응용중화안경사독인자(CVF)건립은정적돈서-SD대서비협조성이충이위심장이식모형.공체돈서화수체SD대서각24지,매조각8지수궤배대분위Ⅰ조(대조조)、Ⅱ조(공백재체조)화Ⅲ조(HO-1기인전염조),분별재공심랭결혈기간경관상동맥완만관주단순적HTK액、함선병독공백재체적HTK액화함유HO-1기인적선병독표체재체HTK액,공심복도후관찰기존활시간;공심정도후취심기조직행병이학검사,RT-PCR검측목적 기인적표체정황,면역조직화학염색진행정성화정위분석.결과 RT-PCR검측증실이충이식심장외원성HO-1기인전록;면역조직화학염색증실목적 기인표체단백재이식심장혈관주위심기세포이급관상동맥미혈관내표체.HO-1표체적이식심장염증세포침윤명현감소,거서세포화NK세포침윤명현감소,심기세포조망감소,이식심장평균존활시간[n=8,(40±3)h]여공백재체조[n=8,(21±2)h,P＜0.01]화대조조[n=8,(20±3)h,P＜0.01]상비명현연장.결론 재공심리체기간,경관상동맥완만관주선병독표체재체개도HO-1기인진행기인전염,가이사보호성공능기인HO-1재이식심장성공전록병표체기상응적공능단백,종이보호이충이식물감경면역손해,연장이충이식심장적존활시간,위진일보적림상응용제공실험의거.
