医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2012年
1期
21-26
,共6页
厉荣玉%钱森和%董群%王萍
厲榮玉%錢森和%董群%王萍
려영옥%전삼화%동군%왕평
白色念珠菌%菌丝相%RAPD反应体系%优化
白色唸珠菌%菌絲相%RAPD反應體繫%優化
백색념주균%균사상%RAPD반응체계%우화
目的 优化白色念珠菌菌丝相培养条件,为白色念珠菌菌丝相的分子生物学研究提供必要条件;建立白色念珠菌菌丝相RAPD的最佳反应体系,应用于其基因组DNA扩增.方法 在RPMI1640培养基的基础上,通过单因素试验研究了小牛血清用量、培养液pH值、培养温度和转种次数等对白色念珠菌菌丝相形成的影响.采用单因素试验,分别研究了Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq酶的浓度、引物浓度和模板DNA浓度对白色念珠菌菌丝相RAPD反应的影响;应用L16(45)正交试验对RAPD反应条件进行了优化.结果 白色念珠菌菌丝相诱导的最佳条件为:每100 ml培养液中的小牛血清用量为10 ml,培养液pH值为7.5,培养温度为36 ℃,转种次数为12次.白色念珠菌菌丝相的最适RAPD反应体系为:Mg2+1.25 mmol/L、dNTPs 0.4 mmol/L、随机引物0.1 μmol/L、TaqDNA聚合酶5 U/50 μl、模板DNA 495 ng/50 μl.结论 通过单因素和正交试验,获得了较适白色念珠菌菌丝相培养条件和其基因组RAPD扩增条件.
目的 優化白色唸珠菌菌絲相培養條件,為白色唸珠菌菌絲相的分子生物學研究提供必要條件;建立白色唸珠菌菌絲相RAPD的最佳反應體繫,應用于其基因組DNA擴增.方法 在RPMI1640培養基的基礎上,通過單因素試驗研究瞭小牛血清用量、培養液pH值、培養溫度和轉種次數等對白色唸珠菌菌絲相形成的影響.採用單因素試驗,分彆研究瞭Mg2+濃度、dNTPs濃度、Taq酶的濃度、引物濃度和模闆DNA濃度對白色唸珠菌菌絲相RAPD反應的影響;應用L16(45)正交試驗對RAPD反應條件進行瞭優化.結果 白色唸珠菌菌絲相誘導的最佳條件為:每100 ml培養液中的小牛血清用量為10 ml,培養液pH值為7.5,培養溫度為36 ℃,轉種次數為12次.白色唸珠菌菌絲相的最適RAPD反應體繫為:Mg2+1.25 mmol/L、dNTPs 0.4 mmol/L、隨機引物0.1 μmol/L、TaqDNA聚閤酶5 U/50 μl、模闆DNA 495 ng/50 μl.結論 通過單因素和正交試驗,穫得瞭較適白色唸珠菌菌絲相培養條件和其基因組RAPD擴增條件.
목적 우화백색념주균균사상배양조건,위백색념주균균사상적분자생물학연구제공필요조건;건립백색념주균균사상RAPD적최가반응체계,응용우기기인조DNA확증.방법 재RPMI1640배양기적기출상,통과단인소시험연구료소우혈청용량、배양액pH치、배양온도화전충차수등대백색념주균균사상형성적영향.채용단인소시험,분별연구료Mg2+농도、dNTPs농도、Taq매적농도、인물농도화모판DNA농도대백색념주균균사상RAPD반응적영향;응용L16(45)정교시험대RAPD반응조건진행료우화.결과 백색념주균균사상유도적최가조건위:매100 ml배양액중적소우혈청용량위10 ml,배양액pH치위7.5,배양온도위36 ℃,전충차수위12차.백색념주균균사상적최괄RAPD반응체계위:Mg2+1.25 mmol/L、dNTPs 0.4 mmol/L、수궤인물0.1 μmol/L、TaqDNA취합매5 U/50 μl、모판DNA 495 ng/50 μl.결론 통과단인소화정교시험,획득료교괄백색념주균균사상배양조건화기기인조RAPD확증조건.
