CAJ | 학술논문

通过建立α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型,对美国圣璜岛海域海绵共附生微生物发酵产物进行活性筛选.其中,α-葡萄糖苷酶活性测试反应体系是在96孔酶标板中进行,在α-葡萄糖苷酶浓度为0.008 U/cm3,pH值为6.8,反应温度为37cC及测定生成物波长为405 nm的基础上,优化筛选模型.结果表明,模型的最佳筛选条件:底物PNPG的浓度为10 mmol/dm3、活性测试反应时间为25min,样品溶剂DMSO含量为2％(V/V).以α-葡萄糖苷酶抑制剂阿卡波糖作为阳性对照样品,根据优化后的抑制活性筛选模型对212株海绵共附生微生物的粗提物样品进行筛选.结果表明:19株微生物的粗提物抑制率大于50％；其中,抑制活性最高的5株菌株的粗提物,在浓度为0.4、0.6、0.8 mg/cm3时,其抑制活性均在70％以上,远远高于阿卡波糖的最高抑制率58％( 1.6 mg/cm3).其中菌株HY936粗提物浓度在0.4 mg/cm3时,仍具有很高的α-葡萄糖苷酶抑制率79.3％.通过16SrDNA序列测定与分析,鉴定该菌株为坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus).坚强芽孢杆菌代谢产物能显著抑制α-葡萄糖苷酶活性,这为研制新型α-葡萄糖苷酶抑制剂提供了有力的线索,对坚强芽孢杆菌有待作进一步的研究.
통과건립α-포도당감매억제제사선모형,대미국골황도해역해면공부생미생물발효산물진행활성사선.기중,α-포도당감매활성측시반응체계시재96공매표판중진행,재α-포도당감매농도위0.008 U/cm3,pH치위6.8,반응온도위37cC급측정생성물파장위405 nm적기출상,우화사선모형.결과표명,모형적최가사선조건:저물PNPG적농도위10 mmol/dm3、활성측시반응시간위25min,양품용제DMSO함량위2％(V/V).이α-포도당감매억제제아잡파당작위양성대조양품,근거우화후적억제활성사선모형대212주해면공부생미생물적조제물양품진행사선.결과표명:19주미생물적조제물억제솔대우50％；기중,억제활성최고적5주균주적조제물,재농도위0.4、0.6、0.8 mg/cm3시,기억제활성균재70％이상,원원고우아잡파당적최고억제솔58％( 1.6 mg/cm3).기중균주HY936조제물농도재0.4 mg/cm3시,잉구유흔고적α-포도당감매억제솔79.3％.통과16SrDNA서렬측정여분석,감정해균주위견강아포간균(Bacillus firmus).견강아포간균대사산물능현저억제α-포도당감매활성,저위연제신형α-포도당감매억제제제공료유력적선색,대견강아포간균유대작진일보적연구.