中华实验和临床病毒学杂志
中華實驗和臨床病毒學雜誌
중화실험화림상병독학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL AND CLINICAL VIROLOGY
2006年
3期
209-212
,共4页
王雷%付士红%李雄%牛新玲%唐青%梁国栋
王雷%付士紅%李雄%牛新玲%唐青%樑國棟
왕뢰%부사홍%리웅%우신령%당청%량국동
脑炎病毒,日本%抗体,单克隆%中和试验
腦炎病毒,日本%抗體,單剋隆%中和試驗
뇌염병독,일본%항체,단극륭%중화시험
目的 制备乙脑病毒单克隆抗体并对其各项生物学性质进行鉴定.方法 通过免疫、融合、克隆和筛选等方法制备乙脑单抗,使用ELISA、IFA、中和试验和Western blot等方法鉴定单抗的敏感性、特异性、种内反应广谱性以及中和活性.结果 最终获得3株稳定分泌的乙脑单克隆抗体细胞株,其滴度均超过106.3株单抗只与乙脑病毒反应,与其他9种虫媒病毒皆不反应.ELISA相加试验证明3株单抗的作用位点非常相近,选择其中的F12.37与10个代表性乙脑病毒株反应,F12.37能够敏感地检测到所有10个在细胞内复制的病毒株.F12.37还能够中和乙脑P3株(基因Ⅲ型)和SH03-103株(基因Ⅰ型),保护50%细胞不产生病变的稀释度分别为1:3.2×105和1:105,Western blot结果显示F12.37与乙脑病毒E蛋白相互作用.结论 本研究获得了3个高滴度、高特异性的乙脑单克隆细胞株,其中F12.37具有较高的敏感性和较好的种内反应广谱性,能够中和两个基因型乙脑病毒,其作用位点位于乙脑病毒E蛋白.
目的 製備乙腦病毒單剋隆抗體併對其各項生物學性質進行鑒定.方法 通過免疫、融閤、剋隆和篩選等方法製備乙腦單抗,使用ELISA、IFA、中和試驗和Western blot等方法鑒定單抗的敏感性、特異性、種內反應廣譜性以及中和活性.結果 最終穫得3株穩定分泌的乙腦單剋隆抗體細胞株,其滴度均超過106.3株單抗隻與乙腦病毒反應,與其他9種蟲媒病毒皆不反應.ELISA相加試驗證明3株單抗的作用位點非常相近,選擇其中的F12.37與10箇代錶性乙腦病毒株反應,F12.37能夠敏感地檢測到所有10箇在細胞內複製的病毒株.F12.37還能夠中和乙腦P3株(基因Ⅲ型)和SH03-103株(基因Ⅰ型),保護50%細胞不產生病變的稀釋度分彆為1:3.2×105和1:105,Western blot結果顯示F12.37與乙腦病毒E蛋白相互作用.結論 本研究穫得瞭3箇高滴度、高特異性的乙腦單剋隆細胞株,其中F12.37具有較高的敏感性和較好的種內反應廣譜性,能夠中和兩箇基因型乙腦病毒,其作用位點位于乙腦病毒E蛋白.
목적 제비을뇌병독단극륭항체병대기각항생물학성질진행감정.방법 통과면역、융합、극륭화사선등방법제비을뇌단항,사용ELISA、IFA、중화시험화Western blot등방법감정단항적민감성、특이성、충내반응엄보성이급중화활성.결과 최종획득3주은정분비적을뇌단극륭항체세포주,기적도균초과106.3주단항지여을뇌병독반응,여기타9충충매병독개불반응.ELISA상가시험증명3주단항적작용위점비상상근,선택기중적F12.37여10개대표성을뇌병독주반응,F12.37능구민감지검측도소유10개재세포내복제적병독주.F12.37환능구중화을뇌P3주(기인Ⅲ형)화SH03-103주(기인Ⅰ형),보호50%세포불산생병변적희석도분별위1:3.2×105화1:105,Western blot결과현시F12.37여을뇌병독E단백상호작용.결론 본연구획득료3개고적도、고특이성적을뇌단극륭세포주,기중F12.37구유교고적민감성화교호적충내반응엄보성,능구중화량개기인형을뇌병독,기작용위점위우을뇌병독E단백.
