中国心脏起搏与心电生理杂志
中國心髒起搏與心電生理雜誌
중국심장기박여심전생리잡지
CHINESE JOURNAL OF CARDIAC PACING AND ELECOPHYSIOLOGY
2009年
4期
337-342
,共6页
黄兴福%杨艳敏%戴研%朱俊%石林惠%张燕婉%浦介麟
黃興福%楊豔敏%戴研%硃俊%石林惠%張燕婉%浦介麟
황흥복%양염민%대연%주준%석림혜%장연완%포개린
电生理学%膜片钳%西沙比利%离子通道%钾通道%HERG基因%人胚肾细胞%免疫蛋白印迹
電生理學%膜片鉗%西沙比利%離子通道%鉀通道%HERG基因%人胚腎細胞%免疫蛋白印跡
전생이학%막편겸%서사비리%리자통도%갑통도%HERG기인%인배신세포%면역단백인적
目的 评价西沙比利对转染HERG基因表达的快速激活延迟整流钾电流(IKr)和蛋白的影响,探讨其致心律失常的机制.方法 使用脂质体介导的瞬时转染法把野生型HERG基因转染进人胚肾细胞(HEK293),采用全细胞膜片钳技术评价西沙比利对IKr通道电流和动力学的影响;使用G418筛选出稳定转染HERG的细胞,并用西沙比利进行干预,应用免疫蛋白印迹技术评价药物对蛋白的影响.结果 西沙比利对IKr通道的刺激电流(IHERG)和尾电流(Itail)具有浓度和电压依赖性抑制作用,半数最大抑制浓度分别14.5和3.9 nmol/L.西沙比利使IHERG和Itail的最大峰值电位前移,但不改变激活电位;使激活曲线左移并加快通道的失活,但不改变通道失活后的恢复时间;西沙比利对转染后的HEK293细胞上的IKr通道蛋白无明显抑制.结论 西沙比利通过作用于通道的失活态抑制HERG钾电流,但不影响HERG通道蛋白的表达.
目的 評價西沙比利對轉染HERG基因錶達的快速激活延遲整流鉀電流(IKr)和蛋白的影響,探討其緻心律失常的機製.方法 使用脂質體介導的瞬時轉染法把野生型HERG基因轉染進人胚腎細胞(HEK293),採用全細胞膜片鉗技術評價西沙比利對IKr通道電流和動力學的影響;使用G418篩選齣穩定轉染HERG的細胞,併用西沙比利進行榦預,應用免疫蛋白印跡技術評價藥物對蛋白的影響.結果 西沙比利對IKr通道的刺激電流(IHERG)和尾電流(Itail)具有濃度和電壓依賴性抑製作用,半數最大抑製濃度分彆14.5和3.9 nmol/L.西沙比利使IHERG和Itail的最大峰值電位前移,但不改變激活電位;使激活麯線左移併加快通道的失活,但不改變通道失活後的恢複時間;西沙比利對轉染後的HEK293細胞上的IKr通道蛋白無明顯抑製.結論 西沙比利通過作用于通道的失活態抑製HERG鉀電流,但不影響HERG通道蛋白的錶達.
목적 평개서사비리대전염HERG기인표체적쾌속격활연지정류갑전류(IKr)화단백적영향,탐토기치심률실상적궤제.방법 사용지질체개도적순시전염법파야생형HERG기인전염진인배신세포(HEK293),채용전세포막편겸기술평개서사비리대IKr통도전류화동역학적영향;사용G418사선출은정전염HERG적세포,병용서사비리진행간예,응용면역단백인적기술평개약물대단백적영향.결과 서사비리대IKr통도적자격전류(IHERG)화미전류(Itail)구유농도화전압의뢰성억제작용,반수최대억제농도분별14.5화3.9 nmol/L.서사비리사IHERG화Itail적최대봉치전위전이,단불개변격활전위;사격활곡선좌이병가쾌통도적실활,단불개변통도실활후적회복시간;서사비리대전염후적HEK293세포상적IKr통도단백무명현억제.결론 서사비리통과작용우통도적실활태억제HERG갑전류,단불영향HERG통도단백적표체.
