中国眼耳鼻喉科杂志
中國眼耳鼻喉科雜誌
중국안이비후과잡지
CHINESE JOURNAL OF OPHTHALMOLOGY AND OTOLARYNGOLOGY
2010年
1期
15-17,附2
,共4页
王蔚%黄倩%钱江%程琰%吴继红%徐萍%张圣海
王蔚%黃倩%錢江%程琰%吳繼紅%徐萍%張聖海
왕위%황천%전강%정염%오계홍%서평%장골해
视网膜母细胞瘤%Rb1基因%变性高效液相色谱%突变
視網膜母細胞瘤%Rb1基因%變性高效液相色譜%突變
시망막모세포류%Rb1기인%변성고효액상색보%돌변
目的 探讨变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)检测视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)Rb1基因外显子突变的情况.方法 收集25例RB患者的肿瘤组织和3例健康者的外周血.提取其基因组,扩增Rb1基因的第3、7、9、12和26个外显子片段,再以DHPLC和DNA直接测序法分别检测其突变情况并进行比较.结果 所有模板均扩增出5个外显子片段.DHPLC分析得第3、7、9、12和26个外显子的最优化检测柱温分别为54.4、55.2、53.4、53.4和55.2 ℃;第3、7、9和12个外显子中,25例患者和3例健康者均呈现同样峰形;而第26个外显子中,有2例患者呈现不同峰形.对所有片段进行测序,第3、7、9和12外显子的扩增片段中未发现突变.而外显子26的扩增片段中,DHPLC峰形和其他片段不同的2个样品也未出现突变.DHPLC和直接测序结果的差异无统计学意义(P>0.05).结论 DHPLC能快速检测出Rb1基因外显子片段的突变位点,可以用于RB的检测.
目的 探討變性高效液相色譜(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)檢測視網膜母細胞瘤(retinoblastoma,RB)Rb1基因外顯子突變的情況.方法 收集25例RB患者的腫瘤組織和3例健康者的外週血.提取其基因組,擴增Rb1基因的第3、7、9、12和26箇外顯子片段,再以DHPLC和DNA直接測序法分彆檢測其突變情況併進行比較.結果 所有模闆均擴增齣5箇外顯子片段.DHPLC分析得第3、7、9、12和26箇外顯子的最優化檢測柱溫分彆為54.4、55.2、53.4、53.4和55.2 ℃;第3、7、9和12箇外顯子中,25例患者和3例健康者均呈現同樣峰形;而第26箇外顯子中,有2例患者呈現不同峰形.對所有片段進行測序,第3、7、9和12外顯子的擴增片段中未髮現突變.而外顯子26的擴增片段中,DHPLC峰形和其他片段不同的2箇樣品也未齣現突變.DHPLC和直接測序結果的差異無統計學意義(P>0.05).結論 DHPLC能快速檢測齣Rb1基因外顯子片段的突變位點,可以用于RB的檢測.
목적 탐토변성고효액상색보(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)검측시망막모세포류(retinoblastoma,RB)Rb1기인외현자돌변적정황.방법 수집25례RB환자적종류조직화3례건강자적외주혈.제취기기인조,확증Rb1기인적제3、7、9、12화26개외현자편단,재이DHPLC화DNA직접측서법분별검측기돌변정황병진행비교.결과 소유모판균확증출5개외현자편단.DHPLC분석득제3、7、9、12화26개외현자적최우화검측주온분별위54.4、55.2、53.4、53.4화55.2 ℃;제3、7、9화12개외현자중,25례환자화3례건강자균정현동양봉형;이제26개외현자중,유2례환자정현불동봉형.대소유편단진행측서,제3、7、9화12외현자적확증편단중미발현돌변.이외현자26적확증편단중,DHPLC봉형화기타편단불동적2개양품야미출현돌변.DHPLC화직접측서결과적차이무통계학의의(P>0.05).결론 DHPLC능쾌속검측출Rb1기인외현자편단적돌변위점,가이용우RB적검측.
