CAJ | 학술논문

目的通过体内包埋实验将优化的脱细胞真皮基质(ADM)与成纤维细胞(FB)体外培养,探讨是否具有生物相容性. 方法用高渗盐-NaOH消蚀法制备得到大鼠ADM,用低浓度戊二醛交联ADM,未交联A组(0min)作为对照,根据交联时间不同分成B组(10min)、C组(15min)和D组(30min).通过大鼠体内包埋实验对比各组ADM 物理性状、包埋后面积、炎性反应、浸润生长的FB和毛细血管数目,选择出最佳交联时间.制备优化的人ADM,用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测ADM的细胞毒性;人FB与ADM复合培养检测其细胞相容性,用免疫组织化学和透射电镜观察FB的生长和增殖情况;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测FBⅠ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达. 结果大鼠体内包埋实验显示,4周取材,未交联组不易触及移植物,植入物和周围的软组织基本融合难以分开;未交联组ADM的面积较包埋前缩小;未交联组ADM内有少量炎性细胞,胶原纤维嗜酸性弱;交联组ADM内未见炎性细胞,浸润生长的FB数目、血管数目与戊二醛交联时间的单因素相关性分析呈负相关;最佳的交联时间为10min.体外培养显示,优化ADM的细胞毒性反应0～1级;人FB能够很好地在优化的ADM表面贴附、生长和增殖;ADM内FBⅠ型、Ⅲ型前胶原mRNA的表达降低. 结论高渗盐-NaOH消蚀法制备ADM,工艺简单、成本低、生物相容性好,可以提供细胞生长的空间,并可在细胞间转导通讯和信号,下调细胞外基质代谢系统.
목적 통과체내포매실험장우화적탈세포진피기질(ADM)여성섬유세포(FB)체외배양,탐토시부구유생물상용성. 방법 용고삼염-NaOH소식법제비득도대서ADM,용저농도무이철교련ADM,미교련A조(0min)작위대조,근거교련시간불동분성B조(10min)、C조(15min)화D조(30min).통과대서체내포매실험대비각조ADM 물이성상、포매후면적、염성반응、침윤생장적FB화모세혈관수목,선택출최가교련시간.제비우화적인ADM,용사갑기우담서염(MTT)비색법검측ADM적세포독성;인FB여ADM복합배양검측기세포상용성,용면역조직화학화투사전경관찰FB적생장화증식정황;반전록취합매련반응(RT-PCR)검측FBⅠ、Ⅲ형전효원mRNA적표체. 결과 대서체내포매실험현시,4주취재,미교련조불역촉급이식물,식입물화주위적연조직기본융합난이분개;미교련조ADM적면적교포매전축소;미교련조ADM내유소량염성세포,효원섬유기산성약;교련조ADM내미견염성세포,침윤생장적FB수목、혈관수목여무이철교련시간적단인소상관성분석정부상관;최가적교련시간위10min.체외배양현시,우화ADM적세포독성반응0～1급;인FB능구흔호지재우화적ADM표면첩부、생장화증식;ADM내FBⅠ형、Ⅲ형전효원mRNA적표체강저. 결론 고삼염-NaOH소식법제비ADM,공예간단、성본저、생물상용성호,가이제공세포생장적공간,병가재세포간전도통신화신호,하조세포외기질대사계통.