生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2010年
12期
182-185
,共4页
张靖%王天云%张俊河%杨保胜%张继红
張靖%王天雲%張俊河%楊保勝%張繼紅
장정%왕천운%장준하%양보성%장계홍
核基质结合区%逆转录病毒栽体%包装细胞系
覈基質結閤區%逆轉錄病毒栽體%包裝細胞繫
핵기질결합구%역전록병독재체%포장세포계
根据GenBank登录的序列号,使用primer5.0进行引物设计,提取人的外周血基因组DNA为模板,PCR方法扩增出人β-珠蛋白MAR序列,将MAR序列插入到逆转录病毒表达栽体pLXSN,构建MAR序列介导的逆转录病毒栽体.酶切和测序鉴定后,阳离子聚合物转染PA317细胞,G418筛选出阳性细胞克隆,提取病毒液上清,测定逆转录病毒颗粒滴度,逆转录病毒颗粒的最高滴度为1.6×106CFU/mL,成功建立了MAR介导的逆转录病毒包装细胞系.
根據GenBank登錄的序列號,使用primer5.0進行引物設計,提取人的外週血基因組DNA為模闆,PCR方法擴增齣人β-珠蛋白MAR序列,將MAR序列插入到逆轉錄病毒錶達栽體pLXSN,構建MAR序列介導的逆轉錄病毒栽體.酶切和測序鑒定後,暘離子聚閤物轉染PA317細胞,G418篩選齣暘性細胞剋隆,提取病毒液上清,測定逆轉錄病毒顆粒滴度,逆轉錄病毒顆粒的最高滴度為1.6×106CFU/mL,成功建立瞭MAR介導的逆轉錄病毒包裝細胞繫.
근거GenBank등록적서렬호,사용primer5.0진행인물설계,제취인적외주혈기인조DNA위모판,PCR방법확증출인β-주단백MAR서렬,장MAR서렬삽입도역전록병독표체재체pLXSN,구건MAR서렬개도적역전록병독재체.매절화측서감정후,양리자취합물전염PA317세포,G418사선출양성세포극륭,제취병독액상청,측정역전록병독과립적도,역전록병독과립적최고적도위1.6×106CFU/mL,성공건립료MAR개도적역전록병독포장세포계.
