东北林业大学学报
東北林業大學學報
동북임업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST FORESTRY UNIVERSITY
2011年
9期
108-111,131
,共5页
胡薇%孟星宇%田玉华%刘宁
鬍薇%孟星宇%田玉華%劉寧
호미%맹성우%전옥화%류저
鹿茸%胰岛素样生长因子1受体%cDNA克隆%差异表达分析%鹿茸再生
鹿茸%胰島素樣生長因子1受體%cDNA剋隆%差異錶達分析%鹿茸再生
록용%이도소양생장인자1수체%cDNA극륭%차이표체분석%록용재생
为了研究梅花鹿鹿茸顶端组织IGF1R基因的表达水平,采用TRIzoL试剂分别提取鹿茸真皮层、间充质层、前软骨层和软骨层总RNA,以逆转录酶AMV反转录合成cDNA,根据GenBank已发表的相关序列设计梅花鹿IGF1R基因特异引物并克隆IGF1R基因,最后利用相对荧光定量Real-time PCR法检测IGF1R基因在鹿茸顶端不同部位组织的表达差异.研究结果表明:试验成功克隆到1203 bp的IGF1R基因序列,该序列包含IGF1R基因的部分编码序列,并编码401个氨基酸长度的多肽；与GenBank中的牛、猪、人和小鼠IGF1R基因进行比对分析,梅花鹿IGF1R基因与牛、猪、人和小鼠IGF1R核苷酸同源性分别为98％、94％、93％和88％；IGF1R蛋白氨基酸序列同源性分别为98.3％、98.5％、97.8％和94.5％.对荧光定量PCR的差异分析发现,IGF1R基因在鹿茸顶端间充质层、真皮层、前软骨层和软骨层存在明显的上调表达现象.
為瞭研究梅花鹿鹿茸頂耑組織IGF1R基因的錶達水平,採用TRIzoL試劑分彆提取鹿茸真皮層、間充質層、前軟骨層和軟骨層總RNA,以逆轉錄酶AMV反轉錄閤成cDNA,根據GenBank已髮錶的相關序列設計梅花鹿IGF1R基因特異引物併剋隆IGF1R基因,最後利用相對熒光定量Real-time PCR法檢測IGF1R基因在鹿茸頂耑不同部位組織的錶達差異.研究結果錶明:試驗成功剋隆到1203 bp的IGF1R基因序列,該序列包含IGF1R基因的部分編碼序列,併編碼401箇氨基痠長度的多肽；與GenBank中的牛、豬、人和小鼠IGF1R基因進行比對分析,梅花鹿IGF1R基因與牛、豬、人和小鼠IGF1R覈苷痠同源性分彆為98％、94％、93％和88％；IGF1R蛋白氨基痠序列同源性分彆為98.3％、98.5％、97.8％和94.5％.對熒光定量PCR的差異分析髮現,IGF1R基因在鹿茸頂耑間充質層、真皮層、前軟骨層和軟骨層存在明顯的上調錶達現象.
위료연구매화록록용정단조직IGF1R기인적표체수평,채용TRIzoL시제분별제취록용진피층、간충질층、전연골층화연골층총RNA,이역전록매AMV반전록합성cDNA,근거GenBank이발표적상관서렬설계매화록IGF1R기인특이인물병극륭IGF1R기인,최후이용상대형광정량Real-time PCR법검측IGF1R기인재록용정단불동부위조직적표체차이.연구결과표명:시험성공극륭도1203 bp적IGF1R기인서렬,해서렬포함IGF1R기인적부분편마서렬,병편마401개안기산장도적다태；여GenBank중적우、저、인화소서IGF1R기인진행비대분석,매화록IGF1R기인여우、저、인화소서IGF1R핵감산동원성분별위98％、94％、93％화88％；IGF1R단백안기산서렬동원성분별위98.3％、98.5％、97.8％화94.5％.대형광정량PCR적차이분석발현,IGF1R기인재록용정단간충질층、진피층、전연골층화연골층존재명현적상조표체현상.
