中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2012年
9期
1651-1657
,共7页
刘晨%杨丹丹%蒋凤兵%白慧丽%李宝林%罗敏%湛晓琴%施琼
劉晨%楊丹丹%蔣鳳兵%白慧麗%李寶林%囉敏%湛曉琴%施瓊
류신%양단단%장봉병%백혜려%리보림%라민%담효금%시경
MicroRNA-450a-3p%小鼠胚胎成纤维细胞%基因,Bub1%胚胎
MicroRNA-450a-3p%小鼠胚胎成纖維細胞%基因,Bub1%胚胎
MicroRNA-450a-3p%소서배태성섬유세포%기인,Bub1%배태
目的:探讨microRNA-450a-3p(miR-450a-3p)对小鼠细胞增殖和胚胎发育的调控是否通过抑制Bub1基因的表达实现.方法:用萤光素酶报告基因实验检测miR-450a-3p能否特异性结合于Bub1基因的3'-非翻译区(untranslated region,UTR);用Western blotting和实时荧光定量RT-PCR检测miR-450a-3p对Bub1蛋白和mRNA表达;分别通过MTT、Hoechst染色、流式细胞术等分析miR-450a-3p对小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)增殖、凋亡和细胞周期等生物学功能的调控;利用染色体核型分析技术检测miR-450a-3p对MEFs染色体数目的影响.结果:miR-450a-3p能与靶基因Bub1的3'-UTR结合,在翻译水平抑制MEFs中Bub1的表达,然而其转录水平的表达却不受影响.miR-450a-3p通过下调靶基因Bub1的表达,抑制MEFs的增殖,促进细胞的凋亡;而且miR-450a-3p还能使大多数细胞停滞在G1/G0期,使细胞分裂受阻,导致细胞染色体数目异常.结论:miR-450a-3p能够调控靶基因Bub1的表达,抑制MEFs增殖,并最终影响小鼠胚胎的发育.
目的:探討microRNA-450a-3p(miR-450a-3p)對小鼠細胞增殖和胚胎髮育的調控是否通過抑製Bub1基因的錶達實現.方法:用螢光素酶報告基因實驗檢測miR-450a-3p能否特異性結閤于Bub1基因的3'-非翻譯區(untranslated region,UTR);用Western blotting和實時熒光定量RT-PCR檢測miR-450a-3p對Bub1蛋白和mRNA錶達;分彆通過MTT、Hoechst染色、流式細胞術等分析miR-450a-3p對小鼠胚胎成纖維細胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)增殖、凋亡和細胞週期等生物學功能的調控;利用染色體覈型分析技術檢測miR-450a-3p對MEFs染色體數目的影響.結果:miR-450a-3p能與靶基因Bub1的3'-UTR結閤,在翻譯水平抑製MEFs中Bub1的錶達,然而其轉錄水平的錶達卻不受影響.miR-450a-3p通過下調靶基因Bub1的錶達,抑製MEFs的增殖,促進細胞的凋亡;而且miR-450a-3p還能使大多數細胞停滯在G1/G0期,使細胞分裂受阻,導緻細胞染色體數目異常.結論:miR-450a-3p能夠調控靶基因Bub1的錶達,抑製MEFs增殖,併最終影響小鼠胚胎的髮育.
목적:탐토microRNA-450a-3p(miR-450a-3p)대소서세포증식화배태발육적조공시부통과억제Bub1기인적표체실현.방법:용형광소매보고기인실험검측miR-450a-3p능부특이성결합우Bub1기인적3'-비번역구(untranslated region,UTR);용Western blotting화실시형광정량RT-PCR검측miR-450a-3p대Bub1단백화mRNA표체;분별통과MTT、Hoechst염색、류식세포술등분석miR-450a-3p대소서배태성섬유세포(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)증식、조망화세포주기등생물학공능적조공;이용염색체핵형분석기술검측miR-450a-3p대MEFs염색체수목적영향.결과:miR-450a-3p능여파기인Bub1적3'-UTR결합,재번역수평억제MEFs중Bub1적표체,연이기전록수평적표체각불수영향.miR-450a-3p통과하조파기인Bub1적표체,억제MEFs적증식,촉진세포적조망;이차miR-450a-3p환능사대다수세포정체재G1/G0기,사세포분렬수조,도치세포염색체수목이상.결론:miR-450a-3p능구조공파기인Bub1적표체,억제MEFs증식,병최종영향소서배태적발육.
