河北医药
河北醫藥
하북의약
HEBEI MEDICAL JOURNAL
2012年
21期
3208-3209
,共2页
赵川%刘维华%张双宅%徐保红%赵冬%张弘
趙川%劉維華%張雙宅%徐保紅%趙鼕%張弘
조천%류유화%장쌍택%서보홍%조동%장홍
麻疹病毒%H基因%基因克隆
痳疹病毒%H基因%基因剋隆
마진병독%H기인%기인극륭
目的 克隆麻疹H蛋白基因,构建重组表达质粒,诱导表达蛋白.方法 麻疹Edmonston株减毒活疫苗中提取基因组RNA,RT-PCR扩增H基因.用限制性内切酶EcoR I和HindⅢ双酶切H蛋白基因片段和pET30a(+)载体,连接后获得重组质粒MV-H-pET30a(+),转化至BL21(DE3),IPTG诱导表达.结果 RT-PCR扩增片段长度约为1 900 bp,与MV-H基因相符.MV-H-pET30a(+)测序结果显示:MV-H基因对码正确,核苷酸序列符合率达99.7%.SDS-PAGE结果表明,菌体中含有特异性蛋白,大小约为86kD.结论 在pET30a(+)成功克隆麻疹H基因,并有目的 蛋白表达.
目的 剋隆痳疹H蛋白基因,構建重組錶達質粒,誘導錶達蛋白.方法 痳疹Edmonston株減毒活疫苗中提取基因組RNA,RT-PCR擴增H基因.用限製性內切酶EcoR I和HindⅢ雙酶切H蛋白基因片段和pET30a(+)載體,連接後穫得重組質粒MV-H-pET30a(+),轉化至BL21(DE3),IPTG誘導錶達.結果 RT-PCR擴增片段長度約為1 900 bp,與MV-H基因相符.MV-H-pET30a(+)測序結果顯示:MV-H基因對碼正確,覈苷痠序列符閤率達99.7%.SDS-PAGE結果錶明,菌體中含有特異性蛋白,大小約為86kD.結論 在pET30a(+)成功剋隆痳疹H基因,併有目的 蛋白錶達.
목적 극륭마진H단백기인,구건중조표체질립,유도표체단백.방법 마진Edmonston주감독활역묘중제취기인조RNA,RT-PCR확증H기인.용한제성내절매EcoR I화HindⅢ쌍매절H단백기인편단화pET30a(+)재체,련접후획득중조질립MV-H-pET30a(+),전화지BL21(DE3),IPTG유도표체.결과 RT-PCR확증편단장도약위1 900 bp,여MV-H기인상부.MV-H-pET30a(+)측서결과현시:MV-H기인대마정학,핵감산서렬부합솔체99.7%.SDS-PAGE결과표명,균체중함유특이성단백,대소약위86kD.결론 재pET30a(+)성공극륭마진H기인,병유목적 단백표체.
