中华血液学杂志
中華血液學雜誌
중화혈액학잡지
Chinese Journal of Hematology
2007年
11期
757-761
,共5页
付劲蓉%刘文励%周剑锋%孙汉英%冉丹%郑邈%罗莉%张恒%周玉峰
付勁蓉%劉文勵%週劍鋒%孫漢英%冉丹%鄭邈%囉莉%張恆%週玉峰
부경용%류문려%주검봉%손한영%염단%정막%라리%장항%주옥봉
Sonic hedgehog%成血-血管干细胞%细胞增殖%细胞分化%细胞迁移
Sonic hedgehog%成血-血管榦細胞%細胞增殖%細胞分化%細胞遷移
Sonic hedgehog%성혈-혈관간세포%세포증식%세포분화%세포천이
目的 探讨Sonic hedgehog(Shh)信号通路对小鼠主动脉-中肾-肾上腺(AGM)区来源的成血-血管细胞增殖、分化和迁移的影响.方法 联合应用抗小鼠CD34、Flk1单克隆抗体(单抗)的磁珠,从孕11 d BALB/c鼠胚胎AGM区分离培养成血-血管干细胞,并同时培养AGM区来源基质细胞,用流式细胞术对所分离细胞进行表型鉴定.用免疫组织化学法检测基质细胞表达Shh蛋白的情况;借助Transwell细胞共培养体系,观察在AGM的基质细胞共培养体系中,不同浓度的Shh活性肽及其单抗对成血-血管干细胞增殖、细胞周期、迁移及向内皮细胞定向分化的影响.结果 AGM区基质细胞高表达Shh蛋白(阳性率高达90%以上),并可促进成血-血管干细胞增殖,其增殖效应可被10.00 μg/mlShh单抗阻断;0.10～10.00 μg/ml外源性Shh活性蛋白与AGM区基质细胞共培养的成血-血管干细胞,可使成血-血管干细胞长时间增殖,并促进细胞迁移,但并不诱导细胞凋亡与分化;而当0.10～10.00 μg/ml外源性Shh活性蛋白作用于单独培养的成血-血管干细胞,细胞经过短时间增殖后,随后发生凋亡并向内皮细胞分化.结论 Shh信号通路参与了成血-血管干细胞的增殖、分化、凋亡及迁移等生物学特性的调控,但其具体作用存在时空的差异,AGM区微环境对Shh信号通路具有整合和调试的作用.
目的 探討Sonic hedgehog(Shh)信號通路對小鼠主動脈-中腎-腎上腺(AGM)區來源的成血-血管細胞增殖、分化和遷移的影響.方法 聯閤應用抗小鼠CD34、Flk1單剋隆抗體(單抗)的磁珠,從孕11 d BALB/c鼠胚胎AGM區分離培養成血-血管榦細胞,併同時培養AGM區來源基質細胞,用流式細胞術對所分離細胞進行錶型鑒定.用免疫組織化學法檢測基質細胞錶達Shh蛋白的情況;藉助Transwell細胞共培養體繫,觀察在AGM的基質細胞共培養體繫中,不同濃度的Shh活性肽及其單抗對成血-血管榦細胞增殖、細胞週期、遷移及嚮內皮細胞定嚮分化的影響.結果 AGM區基質細胞高錶達Shh蛋白(暘性率高達90%以上),併可促進成血-血管榦細胞增殖,其增殖效應可被10.00 μg/mlShh單抗阻斷;0.10～10.00 μg/ml外源性Shh活性蛋白與AGM區基質細胞共培養的成血-血管榦細胞,可使成血-血管榦細胞長時間增殖,併促進細胞遷移,但併不誘導細胞凋亡與分化;而噹0.10～10.00 μg/ml外源性Shh活性蛋白作用于單獨培養的成血-血管榦細胞,細胞經過短時間增殖後,隨後髮生凋亡併嚮內皮細胞分化.結論 Shh信號通路參與瞭成血-血管榦細胞的增殖、分化、凋亡及遷移等生物學特性的調控,但其具體作用存在時空的差異,AGM區微環境對Shh信號通路具有整閤和調試的作用.
목적 탐토Sonic hedgehog(Shh)신호통로대소서주동맥-중신-신상선(AGM)구래원적성혈-혈관세포증식、분화화천이적영향.방법 연합응용항소서CD34、Flk1단극륭항체(단항)적자주,종잉11 d BALB/c서배태AGM구분리배양성혈-혈관간세포,병동시배양AGM구래원기질세포,용류식세포술대소분리세포진행표형감정.용면역조직화학법검측기질세포표체Shh단백적정황;차조Transwell세포공배양체계,관찰재AGM적기질세포공배양체계중,불동농도적Shh활성태급기단항대성혈-혈관간세포증식、세포주기、천이급향내피세포정향분화적영향.결과 AGM구기질세포고표체Shh단백(양성솔고체90%이상),병가촉진성혈-혈관간세포증식,기증식효응가피10.00 μg/mlShh단항조단;0.10～10.00 μg/ml외원성Shh활성단백여AGM구기질세포공배양적성혈-혈관간세포,가사성혈-혈관간세포장시간증식,병촉진세포천이,단병불유도세포조망여분화;이당0.10～10.00 μg/ml외원성Shh활성단백작용우단독배양적성혈-혈관간세포,세포경과단시간증식후,수후발생조망병향내피세포분화.결론 Shh신호통로삼여료성혈-혈관간세포적증식、분화、조망급천이등생물학특성적조공,단기구체작용존재시공적차이,AGM구미배경대Shh신호통로구유정합화조시적작용.
