CAJ | 학술논문

目的:了解在糖尿病肾病(DN)发生发展过程中,CXCL16在db/db小鼠肾脏中的表达变化,并对其与DN的相关性进行初步探讨. 方法:选取分别代表DN不同发展阶段的4、8、12、16和20周龄的dh/db小鼠和同龄db/m小鼠各6只;取左肾的一半用于提取总RNA;右肾用于制作冰冻切片、石蜡切片、电镜标本等;利用半定量RT-PCR的方法分析各组小鼠肾脏中CXCL16 mRNA相对表达水平,以免疫组化的方法分析CXCL16蛋白在各组小鼠肾组织中的表达和分布情况;同时测定各组小鼠的体重、血糖、血三酰甘油、血胆固醇和24h尿白蛋白排泄量,分析各组小鼠的肾脏组织病理情况以了解小鼠DN的发生发展情况. 结果:(1)与同龄的db/m小鼠相比,4周龄的db/db小鼠的体重有所增加,但血糖、血三酰甘油、血胆固醇、24h尿白蛋白排泄量均无明显差异,肾脏组织病理分析也无明显变化,说明4周龄的db/db小鼠尚未发生糖尿病;但8周龄的db/db小鼠的血糖、24h尿白蛋白排泄量均已有明显升高,且肾组织中也已出现肾小球肥大、系膜区扩张、基膜增厚等DN病理改变,说明8周龄的db/db小鼠已发生了DN,但从各方面的情况来看,8周龄db/db小鼠的DN仍较轻,可代表DN早期的情况;自8周龄以后,db/db小鼠的血糖、血三酰甘油、血胆固醇、尿白蛋白排泄量以及肾小球肥大、系膜区扩张、基膜增厚等情况随着鼠龄的增长而不断的增加,说明db/db小鼠的DN不断进展.(2)与同龄的db/m小鼠相比,CXCL16在4周龄的db/db小鼠肾脏中的表达并没有明显变化;但8周龄db/db小鼠肾脏中CXCL16的表达水平已有所增加.此后,随着鼠龄的增加,DN的进展,CXCL16的表达水平逐渐增加.(3)在成年正常小鼠,CXCL16主要分布于小鼠肾脏髓质的小管中,相对来说在肾脏皮质中的分布较少;在DN小鼠,分布在肾小管和小球中的CXCL16均有明显增加;且肾小球CXCL16的表达增加主要发生在足细胞的位置.(4)CXCL16在幼年小鼠(指4周龄的db/m和db/db小鼠)肾脏中的表达分布与成年小鼠(指8周龄以上)亦存在一些差异,这可能提示CXCL16与小鼠肾脏的正常生长发育有关. 结论:db/db小鼠肾脏中CXCL16的表达随DN的发生发展而增高,至少在时间上与DN具有相关性,提示CXCL16可能参与DN的病理过程. 目的:瞭解在糖尿病腎病(DN)髮生髮展過程中,CXCL16在db/db小鼠腎髒中的錶達變化,併對其與DN的相關性進行初步探討. 方法:選取分彆代錶DN不同髮展階段的4、8、12、16和20週齡的dh/db小鼠和同齡db/m小鼠各6隻;取左腎的一半用于提取總RNA;右腎用于製作冰凍切片、石蠟切片、電鏡標本等;利用半定量RT-PCR的方法分析各組小鼠腎髒中CXCL16 mRNA相對錶達水平,以免疫組化的方法分析CXCL16蛋白在各組小鼠腎組織中的錶達和分佈情況;同時測定各組小鼠的體重、血糖、血三酰甘油、血膽固醇和24h尿白蛋白排洩量,分析各組小鼠的腎髒組織病理情況以瞭解小鼠DN的髮生髮展情況. 結果:(1)與同齡的db/m小鼠相比,4週齡的db/db小鼠的體重有所增加,但血糖、血三酰甘油、血膽固醇、24h尿白蛋白排洩量均無明顯差異,腎髒組織病理分析也無明顯變化,說明4週齡的db/db小鼠尚未髮生糖尿病;但8週齡的db/db小鼠的血糖、24h尿白蛋白排洩量均已有明顯升高,且腎組織中也已齣現腎小毬肥大、繫膜區擴張、基膜增厚等DN病理改變,說明8週齡的db/db小鼠已髮生瞭DN,但從各方麵的情況來看,8週齡db/db小鼠的DN仍較輕,可代錶DN早期的情況;自8週齡以後,db/db小鼠的血糖、血三酰甘油、血膽固醇、尿白蛋白排洩量以及腎小毬肥大、繫膜區擴張、基膜增厚等情況隨著鼠齡的增長而不斷的增加,說明db/db小鼠的DN不斷進展.(2)與同齡的db/m小鼠相比,CXCL16在4週齡的db/db小鼠腎髒中的錶達併沒有明顯變化;但8週齡db/db小鼠腎髒中CXCL16的錶達水平已有所增加.此後,隨著鼠齡的增加,DN的進展,CXCL16的錶達水平逐漸增加.(3)在成年正常小鼠,CXCL16主要分佈于小鼠腎髒髓質的小管中,相對來說在腎髒皮質中的分佈較少;在DN小鼠,分佈在腎小管和小毬中的CXCL16均有明顯增加;且腎小毬CXCL16的錶達增加主要髮生在足細胞的位置.(4)CXCL16在幼年小鼠(指4週齡的db/m和db/db小鼠)腎髒中的錶達分佈與成年小鼠(指8週齡以上)亦存在一些差異,這可能提示CXCL16與小鼠腎髒的正常生長髮育有關. 結論:db/db小鼠腎髒中CXCL16的錶達隨DN的髮生髮展而增高,至少在時間上與DN具有相關性,提示CXCL16可能參與DN的病理過程.
목적:료해재당뇨병신병(DN)발생발전과정중,CXCL16재db/db소서신장중적표체변화,병대기여DN적상관성진행초보탐토. 방법:선취분별대표DN불동발전계단적4、8、12、16화20주령적dh/db소서화동령db/m소서각6지;취좌신적일반용우제취총RNA;우신용우제작빙동절편、석사절편、전경표본등;이용반정량RT-PCR적방법분석각조소서신장중CXCL16 mRNA상대표체수평,이면역조화적방법분석CXCL16단백재각조소서신조직중적표체화분포정황;동시측정각조소서적체중、혈당、혈삼선감유、혈담고순화24h뇨백단백배설량,분석각조소서적신장조직병리정황이료해소서DN적발생발전정황. 결과:(1)여동령적db/m소서상비,4주령적db/db소서적체중유소증가,단혈당、혈삼선감유、혈담고순、24h뇨백단백배설량균무명현차이,신장조직병리분석야무명현변화,설명4주령적db/db소서상미발생당뇨병;단8주령적db/db소서적혈당、24h뇨백단백배설량균이유명현승고,차신조직중야이출현신소구비대、계막구확장、기막증후등DN병리개변,설명8주령적db/db소서이발생료DN,단종각방면적정황래간,8주령db/db소서적DN잉교경,가대표DN조기적정황;자8주령이후,db/db소서적혈당、혈삼선감유、혈담고순、뇨백단백배설량이급신소구비대、계막구확장、기막증후등정황수착서령적증장이불단적증가,설명db/db소서적DN불단진전.(2)여동령적db/m소서상비,CXCL16재4주령적db/db소서신장중적표체병몰유명현변화;단8주령db/db소서신장중CXCL16적표체수평이유소증가.차후,수착서령적증가,DN적진전,CXCL16적표체수평축점증가.(3)재성년정상소서,CXCL16주요분포우소서신장수질적소관중,상대래설재신장피질중적분포교소;재DN소서,분포재신소관화소구중적CXCL16균유명현증가;차신소구CXCL16적표체증가주요발생재족세포적위치.(4)CXCL16재유년소서(지4주령적db/m화db/db소서)신장중적표체분포여성년소서(지8주령이상)역존재일사차이,저가능제시CXCL16여소서신장적정상생장발육유관. 결론:db/db소서신장중CXCL16적표체수DN적발생발전이증고,지소재시간상여DN구유상관성,제시CXCL16가능삼여DN적병리과정.